08.光谱学与光谱分析课件.pptVIP

* 激发光脉冲截至后相对于激发光脉冲的不同延迟时刻测得的荧光发射谱。 第一节 时间分辨光谱测量技术 两种表示法： 荧光衰减谱 和时间分辨荧光光谱 N(t) or I(t) t 激发脉冲 荧光衰减曲线 1/e τ 荧光衰减光谱 I λ t I λ t=10ns t=5ns t=0ns 时间分辨荧光光谱 单脉冲激发 (single-pulse excitation)方法。 一、时域测量方法 ①时间相关单光子计数法：灵敏度最高 样品池 衰减器D B PMT 时间-幅度转换器 (TAC) 多通道脉冲高度 分析器 A PMT 荧光信号 ti t0 启动 终止 参考信号 激光脉冲 SP(束裂片) 弱光 强光 时间相关单光子记数技术的方框图 V t ti t0 Vi 通道数 光子计数 TCSPC方法的信号获取 ②条纹照相机 (streak camera) 将光辐射的时间特性转变为空间特性 皮秒 (10-12s) 级超快光辐射 条纹照相机的原理图 被测光脉冲 PMT 扫描发生器 光阴极 栅极 聚焦极 阳极 偏转板 照相机 荧光屏 y z Fluorescence image captured with a streak camera following 355 nm laser excitation of the dye Picogreen in double stranded DNA