12第十二章实验动物胚胎工程技术课件.pptVIP

嵌合体动物的制备： 1.聚合法 用聚合法制作嵌合体动物，是将遗传上不同（例如毛色不同）的两个8～16细胞胚胎用物理方法聚合起来。 2.注射法 注射法是将胚胎干细胞或其他胚细胞注入桑椹胚或囊胚腔中来制作嵌合体动物。 3.带有外源基因的体细胞通过克隆技术进入胚胎 将带有外源基因的体细胞作为供体，通过核移植技术克隆到去核卵母细胞，在体外发育成囊胚，再移植到假孕动物的子宫中。出生后动物的基因型与供体的基因型完全一致。 外源基因 早期胚胎 显微注射法 逆转录病毒法 外源基因 ES细胞 体细胞 电穿孔法 脂质体法 嵌合体动物 克隆动物 嵌合体技术 体细胞移植技术 外源基因进入胚胎的几条途径 外源基因进入细胞后的命运 外源DNA进入细胞后有三种命运： 1．被胞内酶降解。 2．以游离状态存在。游离的未整合外源DNA只要有真核细胞能识别的启动子、编码基因以及poly(A)信号等，一般都能得到表达，但随着细胞衰老，表达力下降。这种表达不能传代，称为暂时表达。 3．整合到受体细胞染色体（只有少数）。整合到受体细胞基因组的外源基因，能随细胞分裂遗传到子细胞，称为稳定表达。 DNA构件导入细胞后可能的整合方式 显微注射法 逆转录病毒感染 精子介导转基因 电穿孔 电穿孔 脂质体转染 磷酸钙转染 生殖细胞或早期胚胎 ES细胞 体细胞 随机整合 定点整合或随机整合 定点整合或 随机整合