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- 2017-03-05 发布于广东
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SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 韩文军 周晓慧 生物技术教研室 一、实验目的 了解电泳实验原理 掌握电泳实验操作规程 学习用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理与技术 二、电泳的基本原理 电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。 三、电泳的分类 从原理上:区带电泳,移界电泳,等速电泳,等电聚焦(IEF),双向电泳等。 凝胶系统的均匀性:连续性凝胶电泳,不连续凝胶电泳 按外形:圆盘状电泳,水平板电泳,垂直板电泳及毛细管电泳等。 被分离的物质是否变性:非变性、变性(SDS-PAGE) 从载体上:自由流电泳,凝胶电泳,琼脂糖电泳,纸电泳等。 四、电泳中的一些基本概念 1.凝胶浓度(T) 2.交联度(C) 3.分离胶 4.浓缩胶 5.迁移率 6.指示剂 7.聚合 8.固定 9.染色 10.脱色 五、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 1. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的特点 (1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的
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