分子生物学1.0探讨.doc

绪论（论述题 必考） 试述分子生物学的主要内容、研究对象、目标及定义、学科分支以及你对分子生物学的认识。 定义：分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的学科，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。 研究对象：核酸、蛋白质等生物大分子 主要研究内容：1）重组DNA技术(基因工程)；2）基因表达调控研究； 3）生物大分子的结构功能研究； 4）基因组、功能基因组与生物信息学研究 分子生物学3条基本原理：1）构成生物体各类有机大分子的单体在不同生物中都是相同的； 2）生物体内一切有机大分子的构成都遵循共同的原则； 3）某一特定生物体所拥有的核酸及蛋白质分子决定了它的属性。 学科分支：基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学等。 发展趋势：20世纪中期以来，生物学正在各个学科之间广泛渗透，相互促进，不断深入和发展，既从宏观和微观、最基本和最复杂等不同方向展开研究，也从分子水平、细胞水平、个体和群体等不同层次探索各种生命现象，逐步揭开生命的奥秘。分子生物学、细胞生物学、神经生物学被认为是当代生物学研究的三大主题，分子生物学的全面渗透推动了细胞生物学和神经生物学的发展。分子生物学研究技术的发展，几乎完全改变了科学家对膜内外信号转导、离子通道的分子结构、功能特性及运转方式的认识。在突触部位神经递质的合成、维持、释放及其作用的分子机制研究上，最近10年所取得的进展远远超过了以往几十年的总和。分子生物学还对发育生物学研究产生了巨大的影响。分子生物学不仅是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。预计分子生物学的研究会为生物学带来一场新的革命。（仅供参考） 对分子生物学的认识和感想：（略） 染色体与DNA 真原核生物基因组的结构特点(P33) 真核生物基因组的结构特点： 1）真核基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组； 2）真核基因组存在大量的重复序列； 3）真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，该特点是真核生物与细菌和病毒之间最主要的区别； 4）真核基因组的转录产物为单顺反子； 5）真核基因是断裂基因，有内含子结构； 6)真核基因组存在大量的顺式作用原件，包括启动子、增强子、沉默子等； 7）真核基因组中存在大量的DNA多态性。（DNA多态性是指DNA序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异，主要包括单核苷酸多态性和串联重复序列多态性两类）； 8）真核基因组具有端粒结构。（端粒是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构，它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合体。其DNA序列相当保守，一般有多个短寡核苷酸串联在一起构成。人类的端粒DNA长5——15千碱基对。它具有保护线性DNA的完整复制、保护染色体末端和决定细胞的寿命等功能） 原核生物基因组的结构特点：基因组很小，大多只有一条染色体，且DNA含量少。 结构简练：原核DNA分子的绝大部分是用来编码蛋白质的，只有非常小一部分不转录，这是与真核DNA的冗余现象不同。 存在转录单元:原核生物DNA序列中功能相关的RNA和蛋白质基因，往往丛集在基因组的一个或几个特定部位，形成功能单位或转录单元，他们可被一起转录为含多个mRNA的分子叫多顺反子mRNA。 有重叠基因：同一段DNA能携带两种不同蛋白质的信息。 2、真核基因表达调控的一般规律 DNA、染色体水平的变化特点：染色质结构、组蛋白作用、DNA拓扑结构变化、DNA甲基化、转录活性去=区对核酸酶敏感 正性调节占主导 翻译与转录分隔进行 转录后加工 Southern杂交 DNA配对 检测有无目的基因的存在 Northern杂交 DNA配对 检测RNA是否表达 Western杂交 抗原抗体配对 检测蛋白质是否表达 DNA的复制（细节题 要求掌握课本内容 P42——57） 3、真核细胞DNA的复制调控(G1 、 S 、 G2和M期） 4、DNA复制有3个水平的调控：细胞生活周期水平调控、染色体水平调控、复制子水平调控 5.DNA聚合酶种类和功能 性质 DNA聚合酶I DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 3’→5’ + + + 5’→3’ + - + 新生链合成 - - + 功能 切除 修复 修复 6、原核生物DNA复制的特点。（P50） 1)原核只有一个起始位点。2)原核复制起始位点可以连续开始新的复制，特别是快速繁殖的细胞。3)原核的DNA聚合酶III复制时形成二聚体复合物。4)原核的DNA聚合酶I具有5-3外切酶活性 DNA解旋酶 通过水解ATP 产生能量来解开双链DNA 单链结合蛋白 保证被解链酶解开的单链在复制完成前保持单链结构 DNA拓扑异构酶 消除解链造成的正