分子生物学2探讨.doc

分子生物学资料 第一章 绪论 DNA的发现：1928年英国科学家Griffith等人发现肺炎链球菌使小鼠死亡的原因是引起肺炎。首先用实验证明基因就是DNA分子的是美国著名的微生物学家Avery。1952年，美国冷泉港卡耐基遗传学实验室科学家Hershey和他的学生Chase从事噬菌体侵染细菌的实验。 分子生物学简史：1847年Schleiden和Schwann提出“细胞学说”，证明动、植物都是由细胞组成的。1962年，美国科学家沃森和英国科学家克里克因为在1953年提出DNA的反向平行螺旋模型而与霍金共享诺贝尔生理医学奖，后者通过对DNA分子的X线衍射研究证实了沃森和克里克的DNA模型。 一．DNA重组技术（recombinant DNA technology） 定义：又称为基因工程，根据分子生物学和遗传学的原理，将一种生物的遗传物质DNA转移到另一生物体中，使后者获得新的遗传性状或表达出所需要的产物。 第二章 染色体与DNA 一、染色体的结构：由DNA和蛋白质组成，蛋白质由组蛋白和非组蛋白组成，组蛋白有：H1、H2A、H2B、H3、H4；核小体由DNA和组蛋白组成。 染色体：（chromosome）是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。 基因组：生物有机体的单倍体细胞中的所有DNA，包括核中的染色体DNA和线粒体、叶绿体等亚细胞器中的DNA。 组蛋白具有以下特性：1、进化上的极端保守性，H4最保守，H3保守性也很强，H2A和H2B较保守，H1保守性最差；2、无组织特异性；3、肽链上氨基酸分布的不对称性；4、组蛋白的修饰作用，包括甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等，H3、H4的修饰作用比较普遍，H2A、H2B、H1不很明显，其中H2B有乙酰化作用，H1有磷酸化作用；5、富含赖氨酸的组蛋白H5。 C值：一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值。 C值反常现象：C值往往与种系进化的复杂程度不一致，某些低等生物却具有较大的C值。 真核细胞DNA序列大致上可被分为3类：1、不重复序列，如卵清蛋白、蚕的丝心蛋白、血红蛋白和珠蛋白等都是单拷贝基因；2、中度重复序列，如各种rRNA、tRNA以及某些结构基因如组蛋白基因等都属于这一类；3、高度重复序列，如卫星DNA。卫星DNA：A ? T含量很高的简单高度重复序列。 三， 真核生物基因组结构特点： 1、真核基因组结构庞大；2、单顺反子；3、基因不连续：断裂基因、内含子和外显子；4、非编码区较多，多于编码序列（9：1）；5、含有大量重复序列。 原核生物基因组结构特点： 基因组很小，大多只有一条染色体；2、结构简练；3、存在转录单位，多顺反子；4、有重叠基因。 转录单位：RNA链的转录，起始于DNA模板的一个特定位点，并在另一位点终止，此转录区域称为一个转录单位 第二节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 所谓DNA的一级结构，就是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表示了该DNA分子的化学构成。 基本特点 ①DNA分子是由两条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成的。 ②DNA分子中的脱氧核糖和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在内侧。 ③两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对，它的组成有一定的规律。这就是嘌呤与嘧啶配对，而且腺嘌呤（A）只能与胸腺嘧啶（T）配对，鸟嘌呤（G）只能与胞嘧啶（C）配对。 2、DNA的二级结构 DNA的二级结构是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。 通常情况下，DNA的二级结构分两大类：一类是右手螺旋，如A-DNA和B-DNA；另一类是左手螺旋，即Z-DNA。 3、DNA的高级结构 DNA的高级结构是指DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定空间结构。超螺旋结构是DNA高级结构的主要形式，可分为正超螺旋与负超螺旋两大类。 DNA的复制 DNA的复制均涉及和蛋白质的参与。 DNA的半保留复制：由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。 DNA的半不连续复制： DNA复制时其中一条子链的合成是连续的，而另一条子链的合成是不连续的，故称半不连续复制。 复制叉：复制时，解链酶等先将DNA的一段双链解开，形成复制点，这个复制点的形状象一个叉子，故称为复制叉 一、DNA的复制 1、DNA的半保留复制 每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，所以这种复制方式被称为DNA的半保留复制（semiconservative replication）。DNA的这种半保留复制保证了DNA在代谢上的稳定性。 2、复制的起点与方向