- 1、本文档共87页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
酵素的发现 enzyme (in yeast) enzyme是希腊文 en = in , zyme = yeast 什么是酶? 酶是生物催化剂 生物体一切生化反应都需酶催化才能进行! 性能远远超过人造催化剂 定义:由活细胞产生的、 有高度专一性和 高效催化作用的生物大分子。 一、酶催化作用的特点 1. 提高反应速度,不改变平衡点; 2. 只起催化作用,本身不消耗; 3. 降低反应的活化能。 1. 易失活(温和性) (1)酶浓度的可调性 (2)通过激素调节酶活性 (3)反馈抑制调节酶活性 (4)抑制剂和激活剂 (5)别构调控、共价修饰、同工酶等 二、酶的化学本质及分类 ①经酸碱水解终产物是AA ②能被蛋白酶水解而失活 ③酶可变性失活 ④酶是两性电解质 ⑤具有不能通过半透膜等胶体性质 ⑥具有蛋白质的化学呈色反应 单纯酶 :只有蛋白质 结合酶(缀合酶):脱辅酶 + 辅助因子 结合酶中: 单独酶蛋白或辅助因子没有催化活性 一种酶蛋白一般只与一种辅助因子结合 同种辅助因子可与不同的酶蛋白结合 monomeric enzyme:一般由一条肽链组成 oligomeric enzyme:为寡聚蛋白,≥2个亚基 multienzyme complex:几种酶靠非共价键 彼此嵌合而成。 由数个独立的酶组合起来形成络合体,催化一系列反应。(如糖代谢、脂代谢) 三、酶的命名和分类 底物1 :底物2 + 反应性质+酶 酶的系统编号:4位数字 第一位:代表六大类反应类型 第二位:亚类(作用的基团或键的特点) 第三位:亚亚类(精确表示底物/产物的性质) 第四位:在亚亚类中的序号 —指酶对底物的选择性,也称特异性。 (1)锁钥学说——刚性构象 (2)诱导契合学说 (3)结构性质互补学说 ——静电效应、极性相同 (4)三点附着学说 ——立体异构专一性的酶 (一) 酶活力与酶促反应速度 酶活力就是酶催化反应的能力 ——能催化多快的反应 通常以测出的酶促反应速度表示 1. 酶促反应速度的测定方法 2.活力单位 (U) 酶单位(U): 在一定条件下、一定时间内、将一定量的 底物转化为产物所需的酶量。 如: 每小时催化1克底物 每小时催化1ml某浓度溶液 每分钟催化1ug底物 在标准条件下(25 ℃ ,最适pH和最适底物浓度)一分钟内催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量。 1 IU= 1 ?mol / min ——酶活力单位标准化 在标准条件下(25 ℃ ,最适pH和最适底物浓度)每秒钟催化1摩尔底物转化为产物所需的酶量。 1 Kat =1 mol/s = 60×106 IU ——酶活力单位标准化 酶活力测定实例 ①确定反应条件 20℃、pH=7,底物浓度 6g/l(过量), 加入2mg固体脂肪酶 ②确定活力单位 每小时催化1克底物 1u= 1g/h ③ 测反应初速度 作产物甘油随时间增加的曲线, 量出反应初速度值 , 换算为脂肪的消耗速度。如 8g/h ④换算活力 8g/h / 1g/h=8u ⑤计算比活 8u/2mg酶蛋白=4u/mg酶蛋白 六、核酶(ribozyme) (2) 1992年,Piccirilli等发现L19RNA具有氨酰酯酶的活性,催化氨酰酯水解。 (3) L19RNA还有限制性内切酶作用: -CpUpCpUpN- + G -CpUpCpU +GpN (4) 1997年,Zhang和Cech用人造的RNA分子催化合成了肽链,表明RNA具有肽基转移酶活性。 (5) 原核生物RNaseP和 兔肌1,4- ?-葡聚糖分枝酶 (二)核酶的种类(自我催化) 自我剪切: 是转录后加工方式之一 (self- cleavage) 自我剪接 (self-s
文档评论(0)