生物制药_基因工程药物教材.ppt

化学合成 中科院上海生化所：高质量的结晶纯品 重组DNA：人工合成人胰岛素 先合成编码胰岛素A链，B链的DNA序列，将其植入大肠杆菌质粒中，提纯肽链，并用二硫键连接起来 先合成胰岛素原，再用酶裂解 人工合成胰岛素不含杂质，不含杂质、胰多肽等 总的来说，人胰岛素与猪等动物胰岛素，药效作用上甚为相近 药效学上的差别： 人正规胰岛素皮下注射后吸收较快，起效时间较早 人超缓胰岛素较之牛的相应制剂作用较短，需每日注射2次 人与动物胰岛素在免疫原性上的差别 人胰岛素的抗原性较牛胰岛素为弱 较猪胰岛素抗原性也轻 用人胰岛素后，血中针对胰岛素抗体的滴度较之使用动物胰岛素后为低 低血糖问题 应用人胰岛素后低血糖的发生较多，可能与强化治疗的应用较普遍有关 由于人胰岛素纯净，抗原性弱，价格降低，故未来的趋势，以采用人胰岛素为主 需由动物胰岛素改用人胰岛素的临床情况 由于动物胰岛素抗原性引起的临床问题：胰岛素过敏、胰岛素抵抗、注射局部脂肪萎缩 动物正规胰岛素引起餐后较晚时的低血糖 间断性用胰岛素最易产生免疫反应，故妊娠糖尿病、2型糖尿病以用人胰岛素为妥 速效胰岛素皮下注射后作用不够快，不能与餐后高血糖同步 迟缓胰岛素在吸收过程中出现峰值，不能模拟生理性的基础分泌 人及动物胰岛素制剂的临床应用不能完全符合生理性需要 为解决上述问题，将胰岛素分子加以改造，以得出超速及超缓的胰岛素类似物 胰岛素多聚体及单体 药用制剂中的胰岛素处于六聚体状态，主要由于浓度过高所致 六聚体外形似一个压扁了的球，直径约5 nm，高度约3.5 nm，由3个相同的二聚体组成 胰岛素注射至皮下后扩散至组织间隙液中，逐渐稀释，离解为二聚体及单体，然后透过毛细血管被吸收入血 血循环中的胰岛素处于单体状态，可直接发挥生物学效应 无免疫原性，不引起免疫反应 化学性质稳定 可与长效胰岛素或胰岛素类似物混合使用，不影响彼此药效 代谢作用明显强于促进细胞有丝分裂作用 促进外周组织对葡萄糖的利用 作用时间：皮下注射后30－60分钟血浓度达峰值，药效持续时间少于4 h 形成二聚体有关的主要部位为B链中氨基酸 B8、B9、B12、B16、B21、B23-29 B16、B23-25与胰岛素结合其受体有关，不能改变，否则影响生物活性 阻碍二聚体形成的策略 在聚合的界面引起一个电荷上的排斥状态 如B28脯氨酸(Pro)换为门冬氨酸(Asp) B28 Asp胰岛素(Novo-Nordisk) 模仿IGF-1的结构 B28 Pro B29 Lys换为B28 Lys B29 Pro Lispro insulin (Eli Lilly) Slow onset of activity Inconvenient for patient (administered 30-60 minutes prior to meal)1 Long duration of activity Potential for late postprandial (4-6 hours)1 Lasts up to 12 hours Adapted from Pampanelll, et al. Diabetes Care. 1995; 18: 1452-1459. * (5 Minutes Before Meal) 6 Non-diabetic Subjects 6 Hum-R Type 1 Subjects * Insulin (mU/I) 0 60 120 180 240 300 360 420 Minutes [Lys (b 28), Pro (B 29)]-Human Insulin Analog (recombinant DNA origin) S S A-chain S S S S B-chain B28 LYS B29 PRO Dissociation of Insulins Regular Human Insulin Clsza K, et al, Structure, 1995; 3: 615-622 Humalog ? formulation formulation capillary membrane 10-3 M 10-3 M 10-5 M 10-8 M peak time 2-4 hr peak time 1 hr 10-3 M 10-3 M transient 10-3 M % Bmax (± serm, n=8) Ligand Concentration (nM) 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 0.01 0.1 1 10 100 1000 10000 Insulin Receptor IGF-1 Humalog Insulin