2013届高三生物三轮复习题型分析专项 专项21 现代生物科技专题 .docVIP

专项21 现代生物科技专题 热点题型分析 热点题型1 透彻理解原理，解答与基因工程工具和操作程序题 【例1】某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大肠杆菌不带有任何抗性基因。下列叙述正确的是 A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒 B． RNA聚合酶是构建该重组质粒必需的工具酶 C．可用含氨苄青霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D．在含氨苄青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌 解析：本题考查基因工程的操作工具和有关过程，属于对理解、应用层次的考查。熟记并理解基因操作的各个过程、抓住“目的基因要插入到基因B中”这一关键信息是正确解答该题的前提。基因操作过程中，用同一种分别切割生长激素基因所在的DNA分子和质粒后，会产生相同的黏性末端，黏性末端连接时，目的基因和目的基因、目的基因和质粒、质粒和质粒都可能连接，导入大肠杆菌的质粒不一定为重组质粒。构建该重组质粒必需的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶。目的基因要插入到基因B中后形成的重组质粒，抗氨苄青霉素基因被破坏，导入了重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素不具有抗性，对链霉素仍具有抗性。 答案：D 【例2】下图是从酵母菌获取某植物需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题： （1）图中cDNA文库??????????? 基因组文库（填“大于”、“等于”或者“小于”）。 （2）①过程提取的DNA需要??????? 的切割，B过程是???????????????? 。 （3）为在短时间内大量获得目的基因，可用???????????? 扩增的方法，其原理是???????????????? 。 （4）目的基因获取之后，需要进行?????????????????????????????????? ，其组成必须有??????????????????????????? 以及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。 （5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是????????? ，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是??????????????????????????? ，可以用????????????? 技术进行检测。 【例3】 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： ? （1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有?? ?? 个游离的磷酸基团。 ? （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越?? ?? 。 ? （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是?? ?? 。 ? （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止?? ?? 。 ? （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入?? ?? 酶。 ? （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了?? ?? 。 ? （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在?? ?? 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 解析：1）因为该质粒为环状，所以在没有经过SmaⅠ切割前，其不含游离的磷酸基团；当被SmaⅠ酶切割后该质粒变成以一条DNA分子，含有两条单链，而在每条单链的都会含有一个游离的磷酸基团。（2）因为对该该质粒进行改造是只插入SmaⅠ酶切位点，相对于质粒的热稳定性而言，含有的C-G碱基对越多，则所含的氢键越多，其热稳定性越高。（3）在质粒和目的基因上都有一个SmaⅠ酶的内切位点，当使用SmaⅠ酶时，会导致质粒上的抗生素抗性基因、目的基因被破坏。抗生素抗性基因被破坏会导致后期在筛选时无法根据抗性基因进行筛选，目的基因被破坏则导致无法得到相应的目的基因的产物。（4）因为如果只使用同一种限制性内切酶，则形成的黏性末端都相同，质粒可以和目的基因进行重组，同时质粒也可以与质粒重组、目的基因也可与目的基因重组，这样就达不到试验的目的。（5）质粒与目的基因都是DNA，要想将两个DNA连接在一起，则需要使用DNA连接酶。（6）载体中一般需要用抗性基因作为标记基因，这样有利于在后期对含有目的基因的细胞进行筛选。（7）由于该细胞已经丧失了对蔗糖吸收的能力，所以只有导入重组质粒的细胞能够吸收蔗糖，故只能在培养基中加入蔗