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2010微生物学复习思考题(下).doc
2010微生物学复习思考题(下)
微生物生长与繁殖的定义。
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微生物生长是细胞物质有规律地、不可逆的增加,导致细胞体积扩大的生物学过程。
繁殖是微生物生长到一定阶段,由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体,引起生命个体数量增加的生物学过程。
在微生物学里, 生长定义为细胞数量的增加。研究微生物的生长主要是研究微生物群体的生长。
细菌群体生长有哪些不同时期?其原因是什么?
(1)迟缓期:细菌数不增加
原因:(1)种子老化:缺乏ATP、重要辅酶、核糖体等
(2
(3
迟缓期的长度因细胞生理状况或培养基条件而异。
(2)对数生长期:最大生长速率,对数增加,平衡生长
(3)稳定生长期:生长速率为零,活菌数最多
原因:(1)某一必需营养物质耗尽,如氧气(好氧菌);
(2
(3pH等环境变化引起细菌不宜生长(产酸菌);
(4Quorum sensing)等。
结果:新的个体产生的数目和死亡的一致,或者细菌细胞有代谢活动但停止分裂。
(4)衰亡期:代谢活性降低、衰老自溶
原因:营养物质耗尽,有毒代谢产物大量积累
死亡的细菌以对数方式增加;
在衰亡期后期,部分细菌产生抗性会使细菌死亡的速率降低。
什么是平衡生长?什么是非平衡生长?
细胞内各成分按比例有规律地增加,所有细胞组分呈彼此相对稳定速度合成。
当营养成分或其他环境因子发生改变时,发生非平衡生长,细胞各组分合成速率不一致,调整适应新环境,直到新的平衡生长的出现。
概念:代时、比生长速率、倍增时间
比生长速率(specific growth rate):即每单位数量的细菌或物质在单位时间内增加的量;
代时(generation time):每个细菌分裂繁殖一代所需的时间;
倍增时间(doubling time):在群体生长中,细菌数量增加一倍所需的时间。
什么是二次生长曲线?什么是葡萄糖效应?
在有速效碳(氮)源存在时,迟效碳(氮)源利用会受到抑制。而速效碳(氮)源利用殆尽时,迟效碳(氮)源会得到利用,表现出明显的第二次生长曲线。
当培养基中存在葡萄糖时,大肠杆菌对其他碳源的利用会受到严格抑制,直到葡萄糖完全消耗为止。
什么是恒化器连续培养、恒浊器连续培养?如何进行连续培养?
在整个培养期间,通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续下去的培养方法。
恒化器连续培养:整个培养过程中通过保持培养基中某种营养物质的浓度基本恒定的方式,使细菌的比生长速率恒定,生长“不断”进行,多用于实验室研究。
恒浊器连续培养:通过连续培养装置中的光电系统,保持培养基中菌体浓度恒定,使细菌生长连续进行的一种培养方式,无营养物质限制,常用于微生物工业。
在微生物培养过程中采用开放系统,不断地补充营养物质和以同样的速率移出培养物。
微生物生长的测定方法有哪些?有什么优缺点?请举例说明。
1 计数法:细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量
直接计数法:显微镜,细菌计数板、血细胞计数板
缺点:不能区分死菌、活菌
间接计数法:活菌计数法,计数菌落,CFU
缺点:容易污染
膜过滤法:样品中菌数很低时
比浊法:分光光度计
2 重量法:
可以用于单细胞、多细胞及丝状体微生物
湿重:离心或过滤分离菌体,洗涤,直接称重。发酵:g菌/L
干重:105℃烘干至恒重
蛋白质量:细菌中蛋白质含量大约为65%,蛋白质含氮量16%,凯氏定氮法
DNA量:8.4X10-14g/细菌细胞
3 生理指标法:
微生物的呼吸强度,耗氧量,酶活性,生物热等
微生物生长的温度三基点是什么?温度对微生物生长的影响有哪些?
最适生长温度;最高生长温度;最低生长温度。
影响:
(1)酶活性;
(2)细胞质膜的流动性;
(3)物质的溶解度。
pH对微生物生长的影响是什么?
pH对微生物生长的具体影响:
直接影响:酸破坏DNA、ATP等;碱破坏RNA、磷脂
间接影响:
(1)营养物质的离子化程度
(2)营养物质的吸收
(3)有害物对微生物的毒害
(4)代谢反应中各种酶活性
根据氧与微生物生长的关系可将微生物分为哪几种类型?氧对微生物有什么副作用,微生物是通过哪种机制消除这种副作用?
好氧菌,微好氧菌,耐氧厌氧菌,兼性厌氧菌,专性厌氧菌。
氧会使生物体产生有毒害作用的代谢产物,如超氧基化合物和过氧化氢,这两种代谢产物相互作用还会产生毒性很强的自由基OH。,可与生物大分子互相作用,导致产生生物分子自由基,从而对机体产生损伤或突变作用,直至死亡。
具有超氧化物歧化酶可催化氧自由基分解成H2O2,然后在H2O2酶作用下生成水。(耐氧厌氧菌、专性厌氧菌无H2O2酶)
培养方式
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