实验3 细菌革兰式染色和的形态观察.pptVIP

实验3 细菌的革兰氏染色 及其形态结构的观察 （一）细菌涂片的制作 1、涂片：取一洁净的载玻片，以无菌接种环挑取少量菌液涂片（直径约1.5cm的均匀薄层） 2、 干燥：自然干燥，也可在酒精灯火焰微微加热烘干。 3 、火焰固定：在外焰快速来回3次左右使细菌固定在在载玻片上。切忌温度过高。 2.1 革兰氏染色法的过程 革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的。实际上，当用结晶紫初染后，像简单染色法一样，所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂，它能与结晶紫结合成结晶紫一碘的复合物，从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。 革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，壁厚、类脂质含量低，用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内，经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。 革兰氏阴性菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高，所以当脱色处理时，类脂质被乙醇(或丙酮)溶解，细胞壁透性增大，使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的红色。  2.3 具体步骤 1 制作细菌涂片：如1.1 2 初染：结晶紫作为初染