果汁中甲醛态氮之测定.ppt

蔬果汁中甲醛態氮之測定(電位滴定法) Determination method for amino nitrogen content in fruit juicepage 66 實驗目的 掌握甲醛滴定法測定胺態氮含量的原理和操作要點 鑑定果汁成分， 原理 加入甲醛溶液於胺基酸雙性離子樣品中，其與胺基酸的非解離型胺基反應，形成羥甲基衍生物[單羥甲基(-NH-CH2OH)和二羥甲基(-N(CH2OH)2 )等]，加入的甲醛固定住胺基的鹼性，使羧基顯示出酸性，此反應完全定量進行會釋放氫離子，此時以NaOH標準溶液滴定-NH3+基上的H+，每釋放一個H+，就相當有一個胺基氮。 (或完全中和-COOH基時的pH值為8.4~9.2) ，根據pH計指示的pH值判斷和控制滴定終點依鹼液消耗之體積換算為百分率，即為甲醛值，甲醛值乘以1.4即為甲胺基氮（甲醛態氮Formaldehyde-nitrogen）之量。 根據胺基酸的兩性作用，用氫氧化鈉標準溶液滴定，。其離子反應式如下： 器材 (一) 電子式分析天平(靈敏度為0.1mg) 一台 (二) 滴定管(50mL) 一支 (三) 滴定管架(白色底座) 一台 (四) 小漏斗(直徑5cm) 一個 (五) 燒杯(50mL) 一個 (六) 電磁攪拌器附滴定管夾 (七)pH度計：直接讀數，測量範圍0～14 pH，精度 ± 0.1 pH。 材料及藥品 柳橙汁(或芭樂汁) ： 100 mL 37%甲醛 pH7.00 標準液 pH10.00 標準液 0. 1N NaOH 標準液(須知力價) 0.01N NaOH 標準液(須知力價) 試樣的製備 一、濃縮蔬果汁 在濃縮蔬果汁中 加入與在濃縮過程中失去的天然水分等量的水，使其成為果汁 並 充分混勻 供測試用。 二、果汁固體飲料 稱取約125g（精確至0.001g）試樣 溶解於蒸餾水中 將其全部轉移到250mL容量瓶 中 用蒸餾水稀釋至刻度 充分混勻 供測試用。 試樣的製備 三、含有碳酸氣的蔬果汁飲料 稱取500g試樣 在沸水浴上加熱15min 不斷攪拌 使二氧化碳氣體盡可能排除去 冷卻後 用水補充至原體積 充分混勻 供測試用。 四、蔬果原汁及蔬果汁飲料 將試樣充分混勻，直接測定。 測定步驟 校正pH計 預熱10min 用4.01的緩衝溶液校正pH計。 再用6.86的緩衝溶液校正pH計。 甲醛溶液(臨用前配): 將25 mL甲醛(37%)以 0.l N 氫氧化鈉溶液調整為 pH 値約為6-7。 在以0.01N NaOH 調整至 8.1。 取燒杯加入 25 g 樣品於150 mL 燒杯中，以 0.l N氫氧化鈉溶液調整至適當pH値8.1，加入 10 mL蒸餾水(取代甲醛溶液)，當做空白試驗。滴定至8.1，滴定數為b毫升。 稱取樣品約 25 g 於150 mL 燒杯中，以 0.l N氫氧化鈉溶液調整至適當pH値8.1，加入 10 mL甲醛溶液，磁石攪拌3分鐘。 以 0.0l N 氫氧化鈉滴定至終點，紀錄所需氫氧化鈉滴定量，滴定數為a毫升 樣品須做二重覆。 測定步驟 錐形瓶編號 試劑 樣品1 樣品2 空白 樣品（g） 25 25 25g 0.1 NaOH溶液滴定至pH 8.1(保持1min不變) 約16mL 中性甲醛溶液 pH 8.1（ml） 10 10 10 mL蒸餾水 0.01N 氫氧化鈉標準溶液滴定至pH 8.1 體積(a mL) 約15mL 體積(a mL) 體積(b mL) 甲醛態氮(mg/100g)= 公式 a：加入中性甲醛溶液後，滴定試樣消耗0.01mol/L氫氧化鈉標準滴定溶液的體積(mL) b：空白滴定體積(mL) 滴定結果紀錄表 加甲醛前耗NaOH 量 (mL )(A) 加甲醛後耗NaOH量 (mL)(B) NaOH標準液濃度 (mol.L-1) 樣 品 滴 定 1 2 平均 空 白 滴 定 1 2 平均 1.第一次滴定(A)是除去其它游離酸，所消耗的NaOH溶液體積不用於計算胺基酸態氮，但可計算總酸含量）。 2.第二滴定(B)才是測定胺基酸，用消耗的NaOH溶液體積進行計算。 計 算 甲醛態氮(mg/100g or100 mL)= 每100g(或100mL)試樣中甲醛態氮的毫克數(mg/100g或mg/100mL); a：加入中性甲醛溶液後，滴定試樣消耗0.01 mol/L 氫氧化鈉標準滴定溶液的體積(mL) b：空白滴定體積(mL) F： 0.01N氫氧化鈉標準滴定溶液的力價 0.14(mg-N/mL)：1 mL 0.01N氫氧化鈉標準滴定溶液相當於氮的毫克數。 允許差 同一樣品的兩次測定結果之差： 樣品之胺基態氮≥10mg/100g，不得大於2%； 胺樣