食品中动物用药残留量检验方法－抗原虫剂多重残留分析.doc

食品中動物用藥殘留量檢驗方法－抗原蟲劑多重殘留分析 99年3月12日署授食字第0991900107號公告 1. 適用範圍：本檢驗方法適用於畜禽產品中抗原蟲劑那寧素（narasin）、海樂福精（halofuginone）、羅苯嘧啶（robenidine hydrochloride）、戴克拉爾（diclazuril）、乃卡巴精（nicarbazin）、待美嘧唑（dimetridazole）及硝基甲嘧唑乙醇（metronidazole）之檢驗。 2. 檢驗方法：液相層析串聯質譜法（liquid chromatography/tandem mass spectrometry, LC/ MS/MS）。 2.1. 裝置： 2.1.1. 液相層析串聯質譜儀： 2.1.1.1. 離子源：電灑離子化（electrospray ionization, ESI）。 2.1.1.2. 層析管：ACQUITY UPLC? HSS T3，1.8 μm，2.1 mm × 10 cm，或同級品。 2.1.2. 均質機（Homogenizer）。 2.1.3. 旋渦混合器（Vortex mixer）。 2.1.4. 超音波震盪器（Ultrasonic vibrator）。 2.1.5. 離心機（Centrifuge）：轉速可達4000 rpm以上者。 2.1.6. 固相真空萃取裝置（Solid phase extraction vacuum manifolds）。 2.1.7. 氮氣蒸發裝置（Nitrogen evaporator）。 2.2. 試藥：乙腈及甲醇均採用液相層析級；甲酸、二甲基甲醯胺（dimethylformamide）、無水硫酸鈉及乙醇均採用試藥特級；海樂福精乳酸鹽標準原液（halofuginone lactate 100 μg/mL，相當於含海樂福精82.2 μg/mL），那寧素、羅苯嘧啶、戴克拉爾、乃卡巴精、待美嘧唑及硝基甲嘧唑乙醇對照用標準品；dimetridazole-d3（DMZ-d3）、4,4’-dinitrocarbanilide-d8（DNC-d8）及metronidazole-d3（MNZ-d3）同位素內部標準品。 2.3. 器具及材料： 2.3.1. 塑膠離心管：50 mL。 2.3.2. 固相萃取匣（Solid phase extraction cartridge）：Sep-Pak? silica, 1 g, 6 mL，或同級品。 2.3.3. 濾膜：孔徑0.22 (m，Nylon材質。 2.3.4. 容量瓶：50 mL。 2.4. 移動相溶液之調製： 2.4.1. 移動相溶液A：乙腈與甲酸以99.9：0.1（v/v）之比例混勻，以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液A。 2.4.2. 移動相溶液B：去離子水與甲酸以99.9：0.1（v/v）之比例混勻，以濾膜過濾，取濾液供作移動相溶液B。 2.5. 內部標準溶液之配製： 　　取DNC-d8、DMZ-d3及MNZ-d3同位素內部標準品各約5 mg，精確稱定。DNC-d8以二甲基甲醯胺溶解並定容至50 mL，DMZ-d3及MNZ-d3分別以甲醇溶解並定容至50 mL，作為內部標準原液。使用時，分別取適量內部標準原液混合後，以50%乙腈溶液稀釋至2.0 μg/mL，作為混合內部標準溶液。 2.6. 標準溶液之配製： 　　取那寧素、羅苯嘧啶、戴克拉爾、乃卡巴精、待美嘧唑及硝基甲嘧唑乙醇對照用標準品各約5 mg，精確稱定。那寧素及羅苯嘧啶分別以乙醇溶解並定容至50 mL；戴克拉爾及乃卡巴精分別以二甲基甲醯胺溶解並定容至50 mL；待美嘧唑及硝基甲嘧唑乙醇分別以甲醇溶解並定容至50 mL，作為標準原液。使用時，分別取適量標準原液以50%乙腈溶液稀釋至那寧素及戴克拉爾為0.02~20 μg/mL，海樂福精、羅苯嘧啶及乃卡巴精為0.05~10 μg/mL，待美嘧唑及硝基甲嘧唑乙醇為0.0025~0.1 μg/mL，作為標準溶液。 2.7. 檢液之調製： 2.7.1. 萃取： 　　? 將檢體細切均質後，取檢體約5 g，精確稱定，置於塑膠離心管中，加入混合內部標準溶液25 μL，靜置10分鐘。再加入乙腈10 mL及無水硫酸鈉10 g，旋渦混合1分鐘後，以超音波震盪5分鐘，於4(C以4000 rpm離心20分鐘，取上清液供淨化用。 2.7.2. 淨化： 　? 　取2.7.1節供淨化用之溶液，注入預先以乙腈5 mL潤洗之固相萃取匣，收集流出液，再以乙腈2 mL沖提固相萃取匣，合併流出液，於40(C以氮氣濃縮至殘留液體積略少於1 mL（註1），以乙腈定容至1.0 mL，經濾膜過濾後，供作檢液。 　　　註1：濃縮至乾，會嚴重影響海樂福