2015届高考生物专题训练：基因工程与克隆技术.docVIP

　基因工程与克隆技术　 (时间：30分钟)考点一　基因工程 1．(2014·福建质检)为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图：(Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达) 请回答： (1)重组载体中SHH基因转录合成RNA探针时，______(需要/不需要)启动子。 (2)步骤②中，用Ca2＋处理大肠杆菌，使之成为______细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有______基因。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断______(蓝色/白色)菌落中的大肠杆菌为重组菌。 (4)将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与__________________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。 解析　(1)由图可知，SHH基因插入在LacZ基因中，LacZ基因被SHH基因插入后不表达，所以要使SHH基因表达就需要启动子。 (2)大肠杆菌细胞用Ca2＋处理后就称为感受态细胞；要在添加氨苄青霉素的培养基上生存，一定要含有抗氨苄青霉素基因才可以，没有抗氨苄青霉素基因将会死亡。 (3)能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X－gal的培养基上会形成蓝色菌落，重组菌中LacZ基因被SHH基因插入后不表达，含有IPTG和X－gal的培养基上会形成白色菌落。 (4)判断SHH基因的转录情况，也就是判断SHH基因是否转录出mRNA。 答案　(1)需要 (2)感受态　Amp(或氨苄青霉素抗性或抗性) (3)白色 (4)SHH转录的mRNA(只写mRNA不可) 2．(2014·山东潍坊一模)下图表示转基因烟草的培育过程。请据图回答： (1)图示过程将外源基因导入受体细胞的方法是______________，若将外源基因导入动物细胞，目前采用最多、最有效的是__________技术。 (2)为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有__________，还应有__________，以利于外源基因的表达。 (3)该过程中用到的植物细胞工程技术是____________，这项技术应在________条件下进行，依据的生物学原理是__________________。 (4)外源基因的检测首先要采用DNA分子杂交技术检测________________，其次采用分子杂交技术检测_____________，最后通过抗原—抗体杂交检测__________________。 答案　(1)农杆菌转化法　显微注射 (2)标记基因　启动子和终止子 (3)植物组织培养　无菌　细胞的全能性 (4)转基因生物的DNA上是否插入了外源基因　外源基因是否转录出了mRNA　外源基因是否翻译成蛋白质 考点二　植物细胞工程 3．(2014·河南豫东、豫北十所名校联考)科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示： (1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_______________________。 (2)过程①常用的酶是__________，细胞融合完成的标志是_________。 (3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂__________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面的荧光的不同可观察到______种不同的原生质体，当观察到____________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。 (4)过程③和过程④依次为______________，过程④中的培养基常添加的植物激素是________________。 (5)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞中含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含______条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________植株。 答案　(1)细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 (2)纤维素酶和果胶酶　形成了新的细胞壁 (3)聚乙二醇(或PEG)　3　融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光 (4)脱分化和再分化　生长素和细胞分裂素 (5)2(m＋n)　单倍体 考点三　动物细胞工程 4．(2014·湖北天门调研)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。 (1)X、Y、Z细胞的名称分别是__________、抗