LontoELISA-生物港.doc

Lonto? ELISA 仅供科研使用，不得用于临床诊断 人乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）定量检测试剂盒（ELISA） 货号：111086 定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）的浓度。 使用试剂盒前，必须仔细阅读本说明书。 中国 | 泉州市蓝图生物科技有限公司 福建省泉州市泉港区界山镇蓝图生物科技园A栋501室 TEL: +86 (595) FAX: +86 (595)E-MAIL: 355902222@ Phone实验原理 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗人乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）的浓度。 试剂盒限制性 仅供科研使用，不得用于临床诊断。 在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。 跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。 使用试剂盒配套的样品稀释。如果值高于最高标准，。蛋白溶液，避免泡。加入一个30秒浸泡，可提高检测精度。℃14天 包被微孔板 96T 预包被固相抗体 2-8℃14天 HRP标记抗体 6mL HRP标记的检测抗体 2-8℃180天 底物液A 6mL 0.01%过氧化氢 2-8℃180天 底物液B 6mL 0.1%TMB 2-8℃180天 30×浓缩洗涤液 20mL 0.05%Tween20 2-8℃180天 说明书 1份 -- -- 自封袋 1个 -- -- 不干胶 2片 -- -- 校准品浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0 NCU/ml。 其他用品 酶标仪 精密移液器及一次性吸头 蒸馏水 洗瓶或者自动洗板机 37℃水浴锅或恒温箱 500ml量筒 质控品（可从蓝图生物科技产品研发系统中选择） 生物安全 检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。 试剂盒的proclin-300防腐剂，可能引起皮肤过敏反应避免吸入烟雾。戴上防护手套，后彻底洗手。颗粒在- 20℃避免反复冻融。血清在- 20℃避免反复冻融。血浆肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在离心分钟在-20℃完全溶解。浓缩洗涤液。底物液A和B混合，15分钟内使用。μL。 样本孔加待测样本50μL。 除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL。 用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复5次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡30s的程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。 将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。 所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。 结果计算 以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD值）作为横坐标，利用计算机软件，采用四参数Logistic曲线拟合（4-pl）三已知的浓度样品进行二十次在一个板块内精度评估。三已知的浓度样品进行二十次在板块内精度评估。最低检出剂量小于三已知的浓度样品进行次在一个板块内评估℃-8℃保存，有效期6个月。 泉州市蓝图生物科技有限公司 2 仅供科研使用，不得用于临床诊断。 泉州市蓝图生物科技有限公司