毛细支气管炎患儿外周血中Th17细胞及Treg细胞的表达及临床意义.doc

毛细支气管炎患儿外周血中Th17细胞及Treg 细胞的表达及临床意义 张艳华，段红宝，段晓峰，孔慧霞，王凯 河南省郑州大学附属郑州市中心医院儿科（河南 郑州）450000 摘要：目的：探讨Th17及Treg细胞在婴幼儿毛细支气管炎外周血中的表达及意义。方法：将实验对象分为3组，80例健康儿童，50例毛细支气管炎患儿（无心衰、呼衰），40例毛细支气管炎患儿合并心衰或者呼衰，应用流式细胞仪检测其外周血中Th17及Treg细胞数量；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组血清中IL-17、IL-10的表达水平。结果：1.毛细支气管炎患儿外周血中Th17细胞数量及IL-17水平较对照组明显升高，其中心衰、呼衰组升高较为明显（p均＜0.05）；2.毛细支气管炎患儿外周血中Treg细胞数量及IL-10水平较对照组明显下降，其中心衰、呼衰组下降较为明显（p均＜0.05）。 结论： Th17细胞及Treg细胞均参与毛细支气管炎发病，并在其中起重要作用，其中Th17细胞占优势。IL-17及IL-10水平可早期预测其疾病发展，对临床工作有一定的指导意义。 关键词： 毛细支气管炎，Th17细胞，Treg细胞，IL-17 毛细支气管炎（bronchiolitis）是一种婴幼儿较常见的下呼吸道感染，多见于1-6个月的小婴儿，临床表现以发热、咳嗽、喘憋、气促为主，引起继发性哮喘的概率极高1。近年来，随着环境污染等因素的改变，发病率逐年上升。越来越多的国内外研究显示2-3毛细支气管炎的发生与免疫因素有关，急性期存在某些细胞因子浓度的异常，导致细胞免疫受损。Th17细胞是近年来新发现的一种CD4 + T淋巴细胞亚群4，它不同于Th1/Th2的表型、分化机制和功能。Th17是重要的促炎性细胞，可通过分泌IL-17诱导多种前炎症细胞因子和趋化因子，参与机体炎症反应5. 以往对于毛细支气管炎较多研究关注其与支气管哮喘在 Th1/Th2 平衡之间的异同。Th2 偏移学说是经典的支气管哮喘发病学说，但目前发现该理论不能完全解释支气管哮喘发病机制，Treg/Th17 细胞平衡也发挥了重要作用。由于在 Treg 细胞调节机体免疫平衡中的重要作用，结合 Th17 细胞能够趋化中性粒细胞从而参与哮喘气道局部炎症的作用，因此推测 Treg/Th17 细胞平衡也参与毛细支气管炎发病。 1.中华儿科杂志编辑委员会.关于婴幼儿哮喘的若干问题[J].中华儿科杂志，1998，36（12）：760-762. 2杜丽娜，赵晓东.重庆地区儿童呼吸道合胞病毒和偏肺病毒分子流行病学研究[J],中国实用儿科杂志，2002,17 (8) :449. 3黄戴洁，刘恩梅.呼吸道细菌定植对毛细支气管炎患儿预后与转归的影响[J]，重庆医科大学学报，2010,32 (9) :571. 因此本研究主要对毛细支气管炎（轻症和重症组）患儿与健康儿童外周血Th17、Treg 细胞及其细胞因子进行比较，以进一步了解其发病机制，为开创新的治疗手段提供免疫学依据。 4陈慧中,苏英姿，齐春华等.A亚型呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的临床研究.[J].中华儿科杂志，1999, 37:32-34. 5 Neves BJ, FonsecaC, Cardoso M, et al. Ralationshipbetween respira-tory syncytial virus subtypeand clinical severity in bronchiolitis.[J]An EspPediatr, 2001, 54: 559-566. 1.资料与方法： 1.1一般资料 将研究对象分为3组：50例毛细支气管炎轻症（无呼衰、心衰等）组、40例毛细支气管炎重症（合并心衰和/或呼衰）组及80例健康儿童对照组。其中90例毛细支气管炎患儿均为2012.01-2014.10在我院儿科住院的患儿，男53例，女37例；年龄小于2岁，其中2-6月40例（30例重症组），6月-1岁35例（10例重症组），1-2岁15例 。所选患儿符合1987年卫生部小儿肺炎防治方案中毛细支气管炎（简称毛支）诊断标准14.心衰诊断标准符合第六版儿科学6. 呼吸衰竭参照血气分析结果。健康对照组为体检健康儿童，年龄1月-2岁。所选患儿均无过敏性疾病家族史及激素应用史。所做研究已征得家长同意及医院医学伦理会批准。 6.杨锡强、易著文.儿科学（第六版）。 1.2方法 1.2.1 样本采集 分别采集毛支患儿及对照组患儿静脉血4-5ml，其中2-3ml于肝素抗凝管中，人淋巴细胞分离液分离，获得外周血单个核细胞（PBMC）；剩余2ml血液离心后，取上层血清0.5ml置于干净冻村管中于-70℃冰箱中保存，待测细胞因子IL-17及IL-10.