生物化学甲实验 实验6 酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度课件1.pptVIP

实验七 用正交法测定几种因素 对蔗糖酶活性的影响 * * 丁鸣 （半自主性设计实验） 一、实验目的和要求 1. 初步掌握正交试验设计法的使用。 2. 运用正交法测定底物浓度、酶浓度、温度和pH值这四种因素对酶活力的影响。 二、实验基本原理 酶的催化作用是在一定条件下进行的，它受多种因素的影响，如酶浓度、底物浓度、温度、 pH值、抑制剂和激活剂等都能影响酶催化的反应速度。通常在其他因素恒定的条件下，通过某一因素在一系列变化条件下的酶活性测定求得该因素的影响，这是单因素的试验方法。对于多因素的试验可以通过正交试验设计法来完成。正交法是借助于正交表，简化的表格计算，正确分析结果，找到实验的最佳条件，分清因素的主次，这样就可以通过比较少的实验次数达到好的实验效果。实践证明正交法是一个多、快、好、省的方法。目前已广泛用于工农业生产和科学实验中。 本实验运用正交法测定底物浓度、酶浓度、温度、pH值这四个因素对酶活性的影响，并求得在什么样的底物浓度、酶浓度、温度和pH值时酶的活性最大。 三、实验材料与试剂 1、实验材料 纯化的蔗糖酶（样品Ⅳ） 2、实验试剂 ⑴ 5%蔗糖（A.R.）溶液（W/V）； ⑵ 0.2mol/L乙酸缓冲液，pH3.6、4.6、5.6； ⑶ 3,5－二硝基水杨酸试剂； 甲液：溶解6.9g