101夏仙树氯冉酸荷移分光光度法测定氨基己酸注射液的含量程序.doc

氯冉酸荷移分光光度法测定氨基己酸注射液含量 届 别 2014届 系 别 化学系 专 业 化 学 学 号 2010121141 姓 名 夏仙树 指导教师 李省云(教授) 二零一四年五月  氯冉酸荷移分光光度法测定氨基己酸注射液含量 学生：夏仙树 指导教师：李省云 太原师范学院化学系 101班 摘 要 本文使用紫外分光光度法研究了氨基己酸与氯冉酸的荷移反应，再以此为基础来测定氨基己酸注射液的含量。由实验可知，在无水乙醇介质中，氨基己酸与氯冉酸在60℃的水浴中加热25min以后，可生成稳定的荷移络合物。此荷移络合物的最大吸收波长λmax=318nm，表观摩尔吸光系数ε=0.80×103L·mol-1·cm-1,线性范围 25-100 μg/mL。 关键词 紫外分光光度法 氨基己酸 氯冉酸 荷移反应 1 引言 荷移反应是指电子相对丰富的分子与电子相对缺乏的分子之间通过电荷转移而形成的络合物的反应[1]。由于这类荷移配合物具有特征吸收峰，摩尔吸光系数较高，这使分光光度法测定痕量含氮的有机物成为可能，基于此反应建立了测定有机化合物如氨基酸、芳胺、生物碱等物质的新方法。该方法测定药物含量，简单准确，专属性强，且具有较高的灵敏度[2]，因此近年来国内外多见报道[3-7]。 氨基己酸，又名6-氨基己酸(ACA)，为白色或淡黄色结晶粉末，能溶于水，其3.52%水溶液为等渗溶液，熔点204-207℃[8]。本品是一种临床常用的止血药，能抑制纤维蛋白溶酶原的激活酶，使纤维蛋白酶原不能被激活为纤维蛋白溶酶，从而抑制纤维蛋白的溶解，达到止血的作用[9]。目前定量测定氨基己酸的方法主要有：柱前衍生高效液相色谱法[10]、分子荧光光谱法[11]、柱后衍生高效阳离子交换色谱法[12-14]等。利用与醌类试剂发生荷移反应测定氨基酸含量的研究较多，如苏氨酸 、苯丙氨酸、L-酪氨酸、色氨酸等[15-17]方法相对成熟，而氨基己酸与醌类试剂发生荷移反应的研究还未见报道。故本文选用氯冉酸为电子接受体，研究了氨基己酸与氯冉酸形成荷移络合物的最佳条件。 2 实验部分 2.1 主要仪器与试剂 仪器 CARY300紫外可见分光光度计（美国Varian）；HH-6电热恒温水浴锅（北京科伟永鑫实验仪器设备厂）；92M-202A-DR电子天平（普利赛斯国际贸易上海有限公司）； 试剂 氨基己酸（国药集团化学试剂有限公司，生化试剂BR）；氯冉酸（恒兴中远化工，化学纯）；无水乙醇（天津市富宇精细化工有限公司，分析纯）；氨基己酸注射液（上海信谊金朱药业有限公司，产品批号110505，标示量10mL：2g）。实验用水为高纯水。 2.2 溶液的配制方法 氨基己酸标准溶液的配制：准确称取0.10026g 氨基己酸，用少量的无水乙醇溶解，转移到100mL的容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成约1.0026g/L的溶液，避光保存，待用。 氯冉酸溶液的配制：准确称取氯冉酸0.10034g，用少量无水乙醇溶解，转移到100mL的容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成1.0034g/L的溶液，待用。 2.3 实验方法 首先准确移取0.25ml氨基己酸试液，再准确移取0.25ml氯冉酸标准溶液于10mL比色管中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在60℃的水浴中加热25min，冷却至室温后，以试剂空白为参比，在318nm最大吸收峰处，测定其吸光度。 在测定后计算得知的氨基己酸样品溶液中，加入一定量的氨基己酸的标准溶液，反应后，测定总的吸光度，用工作曲线计算回收率的氨基己酸标准溶液的量除以加入的量，即得回收率。 3 结果与讨论 3.1 精密度的测定 在选定的最佳条件下，即：首先准确移取氨基己酸标准溶液0.25mL，再移取氯冉酸标准溶液0.25mL于10mL比色管中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，在60℃下水浴加热25min并冷却至室温后，以试剂空白为参比，在300nm-500nm范围内进行波长扫描，测其吸光度，按照实验方法平行测定10次，结果见表1。结果表明，该方法的相对标准偏差为4.50%。 表1 精密度的测定 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 A 0.4158 0.4014 0.4132 0.4101 0.4112 0.3802 0.4082 0.4292 0.4012 0.3662 3.2 工作曲线的绘制 在选定的实验条件下，准确移取不同量的氨基己酸标准溶液（0.25—1.0 mL），在最佳条件下反应，测定络合物的吸光度，并绘制工作曲线，其结果见表2、图1。结果表明：氨基己酸含量在45～10