DNA损伤的光电化学检测.pdf

第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 C电化学生物传感器与生物分析化学 西03DNA损伤的光电化学检测 梁敏敏郭良宏木 (中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室，北京100085) 摘要：用光电化学装置检测出由化学试剂所导致的DNA损伤。结果显示当损伤 DNA的浓度只有5ug／mL时，光电流就已经有很显著的变化，这说明整个光电化学检 测系统非常的灵敏，完全可以用来检测DNA的化学损伤，光电化学反应可以作为一种 新的检测DNA损伤的机理。 环境中的有毒物质所造成的DNA损伤能够改变DNA序列，引起DNA的突变，致 使基因表达异常，导致癌变【l_J，因此，DNA损伤的高灵敏、高选择性检测势在必行。 许多检测方法已被用来这种类似生物检测，例如，目前常用的抗原一抗体系统、杂 交和蛋白一配合物体系。光电化学系统[34】分别使用光和电流两种完全不同的信号形 式作为激发和检测，背景信号底，信噪比高，整个检测系统的灵敏度高，因此在生 物检测方面具有非常吸引人的前景。 米二氧化锡SnO。作为半导体电极的材料，纳米颗粒二氧化锡在导电基质ITO上制备。 473纳米的蓝色激光作为激发光源，电化学工作站检测光电信号，Ag／AgCl为参比电 极，Pt片为对电极。图1是ITO电极板和制备好的纳米二氧化锡的电镜图，由图可 见，二氧化锡颗粒的厚度在纳米级。 Fig．1SEMsofITO(1eft)，Snoz(right)． 在光电检测中，标记物分子Ru(bpy)：，2+的电子在光的作用下跃迁至激发态 Ru(bpy)：，2”(如式1所示)，激发态电子随后迁移至半导体电极上，产生光电流(如 式2所示)，标记物分子因失去一个电子变为氧化态Ru(bpy)33+oDNA的鸟嘌呤碱(G) 最易被氧化，因此，G可以作为电子给予体还原标记物分子，从而使它进入到新一 轮的光电反应中(如式3所示)，这样就在很大程度上增强了光电信号。DNA损伤后 180 部分碱基被氧化，导致DNA双链结构的破坏，双链保护下的碱基被不同程度的释放 出来，使其更加容易的参与反应，发挥其催化作用，因此，和未损伤的DNA相比， 就能更大程度的增强光电信号，DNA损伤的程度不同其光电信号的强度也就不同， 因此这种光电化学系统能够灵敏的检测出损伤的DNA。 光激发： Ru(bpy)：，2++hv Ru(bpy)：，2++ (1) 一一— 光电流产生： …一÷ Ru(bpy)：，孙 (2) Ru(bpy)：，2+’一e …一— (3) 光电流催化： Ru(bpy)：；3+十G Ru(bpy)：、弘 图2是为光电化学检测不同浓度损伤DNA的光电流图。由图可见，光电化 学系统对损伤DNA的检测非常得灵敏，即使当其浓度只有5ug／mL时，和背景电 流相比其光电流值仍有很明显的增强。 ONAconcentration Damaged Img／mL) Anodic ofavidin—Rucoated electrodeinthe Fig．2 photocurrentresponse Sn02nanoparticle of DNA．PhotocurrentmeasurementWaS in20mM presencedamaged performed phosphate buffer,pH 5．5．The sourcewas