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DNA片段在微流控芯片中迁移的双对数图研究 傅超然 梁恒2 西安交通大学生命科学与技术学院分离科学研究所，710049 将无胶筛分毛细管电泳的进样、混合、分离集成于仅JL个平方厘米芯片上，就构成了初 2100 步的微全分析系统(u—TAS)，当前AgilentBioanalyzer是u—TAS的商品仪器之一， 其DNA片段的迁移规律应该与在毛细管电泳中的相似。DNA片段在筛分电泳中的双对数图，即 出的电泳力学迁移模型(EM姗)推导出来，并用于推算DNA片段相对构象的变化“’21。它也被 用来判断分离过程中溶质大分子迁移机理¨，。 2100 在Agilent 中图A为DNA DNA样品。 Ladders在四种操作模式下的InN对Intr双对数图。图B为其它13 图中Int，一InN曲线均为“S”形与文献¨1结果相似。曲线可分为三部分，中间部分较陡。DNA-1000 的两端较平缓，其中DNA-1000 Ladder(1000bp一17000bp)的斜率为一0．0728(R2=0．9920)接近 ofthe DNA onDNA relative mobility(·Int．)of size(InN．)onthe Fig1．Dependence electrophoretlc fragments of 2100 fourDNA thirteen Agilent Bioanalyzer．A)Theare ladders，DNA·500、1000、7500and12000．B)The microchips samples aleDNA-500PCRMixl、PCRMix2、PCRMix3：DNA—1000 samples NEBlkb Mass DNALadder． Sample3；DNA-12000 II、HighLadder、Synthetic Ladder、Ad21Dral、Ad21Bgl 文献隋1报道的无胶筛分毛细管电泳的相关值斜率平均值-0．079，这说明DNA片段无胶筛分毛细 2100 管电泳币IAgilentBioanalyzer的u-TAS模式中的迁移行为是相似的。 2通讯联系人 当DNA片段以爬行模式迁移时，曲线斜率应为一1．0，而在图1中，曲线最陡部分的斜率 远没有达到一1(即图中黑实线)，这说明DNA片段在芯片中的迁移不是以爬行模型H1为主。电 化，说明DNA片段在电泳芯片中迁移时，其相对构象显著地偏离了球形(球形粒子的心=113) “·引。DNA片段越火，筛分介质浓度越大，DNA迁移时被拉伸而变形的程度越大，其相对构象参 数疋也应该越大。 离范围为300-700bp。从图可见，在四种操作模式下，都没有出现平台区，这说明各操作模式 在对应的DNA范围内所有的DNA片段都得到了较好的分离。 文献 1 粱恒．顾俊岭．王正刚．傅若农，生物医学色谱新进展(西北大学出版社)，1994。2．394-395 2． 粱恒．顾俊岭，傅若农。科学通报，1995，40，383． 3．Protozanova 998，75，249·257． E．，MacgregorJr．R．B．，Biophys．Chem．，l 4． Mimik L．，SalomeL．，Viovy,J．L．，HellerC．，J．Chromatogr．A，1995，710，309·321． 5．De O．，Schwinefus s．C．，MichaelM．D—J Carmejane J．J．，Wang Chromatogr．A，1999，849,267-276． 74