一種同時測定9個PMP衍生化單糖的改良HPLC方法及其在靈芝菌絲體多醣組成分析中的應用.pdfVIP

第七眉海峡雨岸嗅菌孥挈衍研讨舍输文集5542 一棰同畴测定9倜PMP衍生化罩糖的改良HPLC 方法及其在巫芝菌绦髓多醣组成分析中的庶用 裼晓彤1 李绪全1 糜可1 周月琴1 於小明2榻鏖竞1 1．上海师鲍大擘生命舆瑗境科挈院微生物舆免疫单研究所，上海市，中圆 2．上海榻裼百草研究所，上海市，中圆 摘 要 保件，送用C18反相柱，碓定用15％和40％(V厂v)乙腈的磷酸疆衡液(50mmol／L，pH6．9)作属流勤相 潢度属18％一25％一100％一100％o测定流速1．0mL／min，梭测波畏属250nm，柱温250Co六槿 申|生糖，2槿糖醛酸和1倜氨基葡萄糖共9租罩糖的PMP衍生物可在骸傈件下同峙得到分雕和定量榆 测。逼用敖方法，五獯曩芝液髓骚酵菌糸糸髓多醣TFA水解物中罩糖俎成也成功地遭行了测定，裙果鼗 lucidum、Goerstedii、Gresinaceum、G 现Ganoderma subamboinense和G如ugae菌糸糸髓多醣中均主 要由葡萄糖、牛乳糖、甘露糖及少量氨基葡萄糖组成，不同的墓芝多醣邃分别有鼠李糖、木糖、岩藻 糖和葡萄糖醛酸及牛乳糖醛酸存在，但在罩糖敷和摩丽比上均不相同。 丽鼹祠：1-苯基-3·甲基一5一毗唑啉酮衍生、高效液相、罩糖、霪芝o —1．‘·===二 日U 舀 tivegna，2004)o相封而雷，氯相色稽和高效 液相色稽在精碓定量分析方面更估傻剪 多醣不懂是粗成生物楼髓的重要大分子， eta1．，2003)o然而罩糖在氯 (Liu，2004；Zhang 许多更具有蕖理活性。真菌震芝(Gano—相色藉分析前需要造行繁璜耗睛的衍生魔 derma)所彦生的多醣已被嚣明具有免疫翮理，而且某些成分如葡萄糖糖醛酸等舍在衍 售fi、抗艟瘤、霞肝、清除自由基、抗血栓、 生遇程中往往我生蒋燮而不能得到正碓分析 抗血脂、翻箭血糖等多獯有益健康的活性 (ChurmsS．C．．1990)o and (李舆裼，2003：LinZhang，2004)o 罩糖用HPLC分析如果不逢行衍生化魔理 多醣的基本徂成秸樽罩位是罩糖，其穗颊 则又因属罩糖不具有强紫外吸收只能用示差 和连接方式决定了多醣的化犟秸棒和性赞， 梭测器等梭测，限制了分析霾敏度oHonda 因此封罩糖组成连行分析可属研究多醣提供 (1989)等人我现，遗原性罩糖能在温和保件 最基本和重要的资飘。罩糖分析方法目前使 下舆1-苯基一3-甲基．5．毗唑啉酮(1．phenyl一3． 用得比较普遍的有氯相色藉(GC)、高效液 相色藉(HPLC)和凝腾鼋泳(Fluorophore-糖-PMP衍生物具有强紫外吸收，能用紫外 assisted 榆测器迤行高囊敏度桧测，监且具有衍生化 carbohydrate-electrophoresis，FACE) et 或毛糸田管鼋泳(CE)等(Yanga1．，1995； 筒罩方便的傻黠，得到了魔泛臆用(Yuan， et and et Zhanga1．，2003；Khandurina’2004；Ben． Suzuki，2003；Shena1．， 2003；Zhang 56 第七眉海峡雨岸真菌罩罩衍研讨畲输文集 研究所提供。 1998)o但是，目前已鞭溥的HPLC傈件只 能榆测5—7槿罩糖，监且封中性罩糖、酸性 罩糖或氨基罩糖的分析需要分成畿倜不同测