第9紫外可见光谱.pptVIP

紫外可见分光光度法(Ultraviolet and Visible Spectrophotometry, UV-VIS) 紫外可见分光光度法又称紫外—可见分子吸收光谱法(Ultraviolet-Visible Molecular Absorption Spectrometry) 紫外—可见吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法 它可用于鉴定和定量测定大量的无机化合物和有机化合物 分子光谱概述(Introduction to Molecular Spectroscopy) 一、分子光谱的产生(Principle) 在分子中，除了电子相对于原子核的运动外，还有组成分子的原子的原子核之间相对位移引起的分子振动和转动 对应电子能级、振动能级和转动能级 图中A、B表示不同能量的两个电子能级，在每个电子能级中还分布着若干振动能量不同的振动能级，它们的振动量子数V=0、1、2、3……表示，而在同一电子能级和同一振动能级中，还分布着若干能量不同的转动能量，它们的转动能量数J=0、1、2、3……表示 Etot=Erot+Evib+Eelect ΔE=hν ΔE 能级差；h 普朗克常数；ν 电磁波频率 光强度变化对波长的关系曲线图—分子吸收光谱图 在电子能级跃迁时，必然伴随着分子振动能级的跃迁 电子能级跃迁和振动能级跃迁时，必然伴随着转动能级的跃迁 Evib比Eelect小10倍，一般在0.05～1eV之间 Erot比Evib小10至100倍 如此小的能量差距，必然使波长间距极小，因而分子的紫外—可见光谱在宏观上呈现带状，称为带状光谱 各种化合物由于组成和结构上的不同都有各自特征的紫外—可见吸收光谱 通过吸收光谱的形状、波峰的位置及强度、波峰的数目等进行定性分析 二、分子光谱的类型(Classification of Molecular Spectroscopy) ΔEelectΔEvibΔErot 远红外光谱 250~25μm 分子转动能级差 红外光谱 25~1.25μm 分子振动能级差 紫外、可见光谱 1.25~0.06μm 分子电子能级差 三、光谱吸收定律 (Absorbance Law) 1. 朗伯比耳定律(Lambert-Beer’s Law) 分子吸收光谱定量分析的基本定律 当一束单色光穿过透明介质时，光强度的降低同入射光的强度、吸收介质的厚度以及光路中吸光微粒的数目成正比 A=-lgT=lg(I0/I)=εbc A ：吸光度 T ：透射比（百分透射比%） I0 ：入射光辐射强度 I ：透射光辐射强度 b ：光通过试样的光程长度（cm） c ：分析物浓度（mol●L-1） ε：摩尔吸收系数（L●mol-1●cm-1） 需要指出的是： 化合物的摩尔吸收系数ε与所用波长、温度和溶剂特性有关 为了补偿入射光和透射光损失的影响，在实际测量中，采用在另一等同的吸收池中放入溶剂作为参比 吸光度具有加和性 摩尔吸光系数是有色化合物的重要特性。 ε 愈大，表示该物质对某波长的光吸收能力愈强，因而光度测定的灵敏度就越高。 ε的值，不能直接取1mol/L 这样高浓度的有色溶液来测量，而只能通过计算求得。由于溶液中吸光物质的浓度常因离解、聚合等因素而改变。因此，计算ε 时，必须知道溶液中吸光物质的真正浓度。但通常在实际工作中，多以被测物质的总浓度计算，这样计算出的ε 值称为表观摩尔吸光系数。文献中所报道的ε 值就是表观摩尔吸光系数值 桑德尔（Sandell)灵敏度 桑德尔灵敏度又叫桑德尔指数，用S表示。在分光光度分析中常常使用。桑德尔灵敏度规定仪器的检测极限为A=0.001时，单位截面积光程内所能检测出被测物质的最低含量，以μg/cm2表示。 S与ε的关系可如下推导： A=0.001=b cε ，即 cb=0.001/ ε c为mol/1000cm3; b为cm,故cb为单位截面积光程内的物质量，即mol/1000cm2。如果cb乘以被测物质的摩尔质量M，就是单位截面积光程内被测物质的质量，即为S，所以 , S=cb/1000×M×106=cbM×103 μg/cm2，代入cb后, 2. 朗伯比耳定律的局限性（Limitations to Beer’s Law） （1）比耳定律本身的局限性 所有的吸光质点之间不发生相互