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专题十四 生物技术实践
高频考点一 微生物的培养与利用
考法一 微生物的培养
1.(2016广西来宾中学5月模拟,39)下表是某同学列出的分离并计数土壤中微生物培养基的配方,据此回答下列问题:
KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g (1)制备培养基时,将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1 000 mL后,还要进行__________和__________。
(2)从功能上看,该培养基属于________培养基,细菌能利用培养基中的氮源是由于能合成________。
(3)用稀释涂布平板法统计样本菌落数时,____________(填“需要”或“不需要”)设置对照组(即不接种进行培养),作用是__________________________________________________________________________________。
(4)某同学在3个培养基上分别涂布稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL,培养一段时间后,其菌落数分别为180、220、320个,则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为____________,此方法测定的活菌数比实际活菌数少的原因为__________________________。
【答案】(1)灭菌 倒平板
(2)选择 脲酶(催化尿素分解的酶)
(3)需要 判断培养基是否被杂菌污染
(4)2.4×109 当两个或多个细菌连在一起时,平板上只能观察到一个菌落
【解析】(1)用稀释涂布平板法统计菌落数,制备培养基时,将上述物质溶解并用蒸馏水定容至1 000 mL后,还要进行灭菌和倒平板。(2)该培养基中含有的尿素为唯一氮源,是选择培养基,提供氮源的是尿素,细菌体内有脲酶,能利用尿素。(3)用稀释涂布平板法统计样本菌落数时需要设置对照组,主要用于判断培养基是否被杂菌污染。(4)1 mL原土壤样液中上述微生物数量=(180+220+320)÷3×106×10=2.4×109(个),用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低的原因是培养基上的菌落可能是由两个或多个细菌形成的。
考法二 考查微生物的筛选计数等综合知识
2.下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实验,回答下列问题:实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。
材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。
(1)方法步骤:
①倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在________旁操作。
②制备土壤稀释液:取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至盛有9 mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。
③涂布:按照由103~107稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布______个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布________个。
④培养:放入恒温箱内,在28~30 ℃下培养3~4 d。
⑤细菌的计数:当菌落数目稳定时,选取菌落数在________的平板进行计数。如果测定的平均值为50,则每克样品中的菌株数是________。(稀释度是105)
(2)预期结果:相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数________(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是_________________________________________________。
【答案】(1)①酒精灯火焰 ③3 1 ⑤30~300 5×107
(2)多于 无氮培养基上只有土壤中的自生固氮菌能生长繁殖,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存
【解析】(1)在酒精灯火焰旁倒平板,可以减少杂菌的污染。为了保证结果准确,一般设置3~5个平板,选择菌落数在30~300的平板进行计数,并取平均值,则每克样品中的菌株数为(50÷0.1)×105=5×107。(2)牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,以消除无关变量对实验结果的影响,该培养基适合土壤中几乎所有细菌生存,所以,它比无氮培养基上的菌落数目多。
高频考点二 传统发酵技术的应用
考法一 果醋、果酒的制作过程
3.(2016陕西西安适应性考试六,39)请回答下列与发酵食品有关的问题:
(1)葡萄酒酿造前需要冲洗葡萄,其
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