加速器质谱技术在DNA加合物检测中的应用.pdfVIP

至0 通路舶调控作用不明确。流式细胞术检测结果表明Smad7基因对BEP2D细胞的凋亡水平没有影响。(5) 使细胞生长增殖能力大大增强，从而有利于肺癌发生、发展。 关键词：Smad7；TGF．B；MAPK；信号转导通路：恶性转化 加速器质谱技术在DNA加合物检测中的应用 游冬青陈杞 第二军医大学放射医学教研室上海200433 大部分的化学致癌物进入体内，或经代谢活化后，可生成亲电子的集团与生物大分子一蛋白或核酸 寻找化学致癌物损伤DNA的证据。现在越来越多的证据已经表明，机体暴露于化学致癌物所导致的DNA 结构的损伤，主要由化学致癌物一DNA加合物所引发的。而DNA的损伤是肿瘤发生的直接原因。加速 mass 器质谱技术(accelerator 前最灵敏的检测手段。 在多阶段的致癌连续事件中，DNA加合物是化学致癌过程中一个早期、可检测到的关键步骤。DNA 加合物一旦逃脱本身的修复，就有可能成为致突、致癌的最小因子。测接触致癌物不同时间的DNA加合 物，反映了组织特异的加合物形成与清除速率，并且与致癌物代谢活化、DNA修复、加合物的稳定性等 因子密切相关。主要研究范畴包括： 测量致癌物与DNA的加合程度来评价致癌物的接触剂量和致癌危险性。所建立的实验动物模型通常是将 实验动物暴露于多种剂量水平的化学致癌物1—2月，以确保足够的时间形成稳定水平的加合物。研究表 明(1)DNA加合物的形成在极低剂量水平仍呈线性反应。(2)加合物的形成通常可致肿瘤的发生，但 却不是肿瘤发生的唯一条件。在某些实验动物模型中发生了肿瘤，但没有DNA加合物的形成，这是通过 DNA加合物／108核苷酸，实验动物模型中肝肿瘤 肿瘤事件发生率相关。同样的研究表明每增加200--500 的发生率上升了5％。 中检测到烷基一DNA加合物以来，该研究领域一通过检测人体内的DNA加合物的水平以确定不同类型 的内暴露发展十分迅速，DNA加合物研究不仅提供了个体的“有效接触量”，还能提供许多化学物质结 构与毒性之间关系及毒物代谢动力学之间的信息，是一项重票的生物监测指标。人体致癌物一DNA加合 物的生物监测可用于阐明DNA加合物的形成与肿瘤危险度之间的关系，在肿瘤分子流行病学研究上具有 良好的应用前景。在合理的流行病学研究设计前提下，Ross，R DNA加合物与肺癌的关系。 物含量与生物学效应之间建立某种内在的联系。将所建立的DNA加合物的AMS测量体系应用于细胞水 平上的生物学效应研究，寻找DNA加合物形成与肿瘤发生的细胞传导通路的改变之间的关系a(2)检测 175 年建立了无细胞体系中DNA加合物的检测方法可用于确定化学防护剂的有效性。国内研究也发现了某些 成份，如茶多酚，绿茶中的ECGC具有抑制苯并芘B(a)P与细胞形成DNA加合物的作用。 (四)DNA加合物的AMS检测方法： 等。在生物医学领域中，应用最广的是32P后标记技术，其检测的灵敏度可达1个加合物／lOs．10lo个核苷 测优势就在于研究机体在极低剂量暴露水平下或环境剂量水平下外源化学毒物对机体的作用，在缺少高 灵敏的检测手段前提下，对低剂量水平的作用效应的认识，主要是通过高剂量实验水平的得到结果外推 而得到的，由于在剂量一效应关系中，存在剂量域的影响，这种外推并不能客观反映出低剂量水平的效 应。AMS的问世，提供了人们研究低剂量效应的直接有力的手段。 Mass 加速器质谱学(Accelerator 术是利用静电场和磁场，使质量不同的离子束，由于其荷质比的不同而分开的一种技术。利用这种技术 可以测量原子质量，同位素丰度，鉴别化合物和混合物，进行成分分析等。具有分析对象范围广’泛，分 辨本领高和分析速度快等优点，但在测量测量长寿命同位索时(如14C)会遇到大量的相同分子和同量异 位素的干扰(如‘4N等)，使其无法被识别。在70中期问世的加速器质谱技术，是～种加速器，质谱和 探测鉴别技术相结合的产物，可克服上述常规质谱仪的不足。加速器质谱主要包括五大部分：离子源、 离子加速系统、离子束偏转和聚焦系统、消除干扰粒子系统和粒子探测系统。加速器质谱可采用回旋加 速器，又可采用串列加速器，但目前世界绝大多数实验室都采用串列加速器。一般采用负离子