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基因检测技术在病原微生物检测及微生物质控中的应用 苑红丽 北京恒信业科技有限公司 北 京 100089 E-mail:yuanhongli@ 摘 要 介绍食品 农产品中致病菌检测及细菌鉴定的主要方法 针对病原菌准确 快速分析的要求着重介绍了商品化 R R 的全自动PCR技术 BAX系统 全自动核糖体RNA基因指纹技术(RiboPrinter系统)以及在食品安全 公共卫生 微生 物质量控制等方面的应用 关键词 基因检测技术; PCR; rRNA基因指纹;病原菌检测;细菌鉴定/分型/溯源 中图分类号 O65 Application of Molecular Methods in Detection of Pathogens and Microbial Quality Control Yuan Hongli (Beijing High Scene Technology Ltd., Beijing 100089, China) Abstract R R technology (BAX system), automated ribotyping (RiboPrinter microbial quality control are especially introduced. Key words 1 引 言 2.3 PCR检测 实现对特异基因片段的体外扩增和检测 其优势 农产品和食品安全是一全球性问题 从不同危害因 检测目标菌的DNA比培养方法快速 8-48小时 比 素在食物中毒中的频率得出结论 无论在发展中国家还 免疫测试方法灵敏 劣势 操作较繁锁 检测费用较高 是发达国家 生物性危害所占的比率均大于化学性等其 存在实验室污染问题 未经验证认可 他因素的危害 由此 病原微生物的检测凸现重要 R 2.4 BAX病原菌检测系统 全球第一台利用PCR检测病原菌的商品化仪器 并 2 食品及环境样品中病原菌的检测方法 且得到国际权威机构的认可 已成为多个国家的官方方 法 使PCR成为微生物检测的常规方法 自2000年11 对病原菌检测的要求:准确可靠地检出病原菌的存 月上市 销售到30个国家400余台 在,并排除假阳性的结果;快速提供检测结果,从而使快速 应对成为可能:国际认可 标准化 可追踪 2.1培养法 样品增菌后在选择性培养基上培养细菌菌落 对可 疑菌落分离后作生化鉴定 优势 金标准 -被广泛接 受 被用作对照方法(e.g. FDA-BAM)低成本 劣势 速度慢(需时2-9天 对实验人员的操作水平有很高的 该仪器的优点是:专一性和包容性极强的引物设计; 要求 简化操作过程,最少的手工操作;直接阅读 阴或阳性 检 2.2免疫测定(ELISA,ELFA,免疫扩散测定) 测结果;专利的PCR片状试剂及闭盖系统将污染降至最 基于抗原-抗体反应 其优势:较快得到假定的结果 低 R 24-48小时内 ;官方承认,广