工业微生物育种在工业生化中的应用成就.pdfVIP

大会专题报告 2004年全田生物技术学术研讨会论文集 工业微生物育种在工业生化中的应用成就 吴松刚 (福建师范大学微生物工程研究所，福州350007)(深圳市绿微康生物工程研究院，深圳518000) I工业徽生物育种四大技术体系 1．1诱变育种 1．2代谢控制育种 1．3杂交育种 1．4基因工程育种 2工业微生物诱变育种 2．1 出发菌株：野生型菌株；生产菌株 2．2诱变剂：物理诱变剂；化学诱变剂；生物诱变剂 2．3变株分离筛选：快速初筛模型；复筛 2．4变株发酵工艺优化：定向优化；基础优化；变株稳定性考核 3工业微生物代谢调控育种 3．1 微生物的代谢调控方式：转录水平酶合成的调控；转译水平酶合成的调控；底物水平酶活力调 控；借助细胞膜透性的控制。 3．2微生物代谢调控育种主要类型：组成型突变株的选育：抗分解调节突变株选育：抗反馈调节突 变育种：营养缺陷型在代谢调控育种中的应用；渗漏缺陷型在代谢调控育种中的应用；次级代谢产物代 谢障碍突变株的应用；解除磷酸盐调节突变株的选育：细胞膜透性突变型的选育。 4工业徽生物杂交育种 4．1体细胞杂交育种‘ 4．2原生质体杂交育种 4-3杂交标记选择 4．4杂交种检出 4．5提高目的产物的诱变育种 4．6杂交变株发酵工艺优化； 4．7杂交变株稳定性考核 S工业徽生物基因工程1If种 5．1基因工程载体 5．2基因工程用酶 5-3基因工程菌的主要步骤 2004年全国生物技术学术研讨会论文集 大会专题报告 6工业微生物育种成功实例(仅限吴松刚实验室) 6．1 灰黄霉素高产耐前体变株1：208的选育与应用：彻底改变原料路线，由乳糖_大米原粮，原料 发酵指数平均O．58总亿川、时·M3，产品中去氯灰黄霉素含量O．2％。 6．2金霉素解除磷酸盐调节变株F．303的选育及发酵特性：缩短发酵周期，发酵时间由l80h缩到 110h，显著降低生产成本；提高发酵指数，发酵指数由0．88总亿川、时·M3提高到1．41总亿川、时·M3。 6．3碱性脂肪酶抗阻遏、增透性高产变株F．868的选育：大幅度提高发酵酶活，由野生型的75U／ml 提高到8500U／ml以上，增幅110倍以上。超过“九五”国家重点科技攻关指标(5500U／m1)。 6．4 Penw／／／／um种间杂种的选育：Penicillium B．53杂交，杂交 chrsoqenum8519×Penicilliumpatalum 菌株发酵液中含有青霉素，菌丝体里含有灰黄霉素，具有一株菌产两种抗生素的能力。 6．5微藻异养化杂交育种：雨生红球藻×啤酒酵母的融合子。实现异养化培养，融合子大量累积8． 类胡萝卜素。 ， 6．6其他已产业化高产生产菌株的选育 6．6．1高产脂微生物F-785的选育：产含不饱和脂肪酸酯量由23％提高到63％以上。 以上。 6．6．4高产谷氨酸产生菌F-108的选育：产酸率由出发菌株的8％提高到14％以上。 6．6．5高产赖氨酸产生菌F-909的选育：产酸率由出发菌株的6％提高到15％以上。 6．6．6 D·Vc高转化率产生菌F-444的选育：对糖的转化率由出发菌株的90％提高到98％。 6．6．7 L·苹果酸高产酸产生菌F-234的选育：产酸率由出发菌株的16％提高到23％以上。 31