布鲁氏菌rOmp3148-74-BLS蛋白的多克隆抗体制备与检测.pdf

2012年22(5) 生 物 技 术 43 建立[J]．山西农业科学 ，2011，39(12)：1239—1242． 化[J]．江苏农业科学 ，2011，39(5)：34—37． [21]王强，金则新，祁彩虹，等．牛膝 ISSR—PCR反应体系的优化[J]． [23]思彬彬，赵海燕，热汗姑 ’阿布都 ．宁夏枸杞 ISSR—PCR反应体 江苏农业科学，2011，39(5)：24—26． 系的建立与优化[J]．江苏农业科学，2011，39(5)：41—43． [22]王涛，贾晓东，李永荣，等．薄壳山核桃 ISSR—PCR反应体系的优 布鲁氏菌rOmp3148—74一BLS蛋白的多克隆抗体制备与检测 杜志强，王建英 (内蒙古科技大学 数理与生物工程学院生物工程与技术研究所，内蒙古 包头014010) 摘要：目的：研究布鲁氏菌Omp31分子的免疫原性。方法：利用 IPTG诱导rOmp31 一BLS融合重组蛋白表达，经过His— tag镍柱进行亲和纯化之后，作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体。结果：rOmp31镐一 一BLS重组蛋白能够被大肠杆菌正确表达， 而且 ，能够作为有效的抗原刺激家兔产生可以相互识别的多克隆抗体。结论：Omp31分子具有较好的免疫原性，可以引起较强的 免疫反应。 关键词：布鲁氏菌；bls基因；omp31基因；融合蛋白质；多克隆抗体 中图分类号：Q785 文献标识码：A doi：10．3969／j．issn．1004—311X．2012．05．114 PolyelonalAntibodyPreparationandDetectionof rOmp3148 BLSPeptidefrom Brucella — 74 一 DUZhi—qiang．WANGJian—ying (InstituteofBioengineeringandTechnology，SchoolofMathematics，PhysicsandBiologicalEngineering， InnerMongoliaUniversityofSciencenadTechnology，Baotou014010，China) Abstract：Objective：TheimmunogenicityofBrucellaOmp31moleculewasstudied．Method：TherOmp3148—74一BLSfusionproteinwas inducedtoexpressusingIPTG．M terpurifiedusingHis—tagnickelaffinitycolumn，therOmp314874一BLSfusionproteinWas usedasthe — antigentostimulatetherabbittOproduceantibody．Result：Theromp314874一BLS fusion proteincouldbecorrectlyexpressedbyE- ． coli．Anditcouldbeusedas theeffectiveantigentostimulaterabbittoproducepolyclonalantibody．Conclusion：BrucellaOmp31mole— culepossessedgoodimmunogenicity，andcouldcauseastrongimmuneresponse． Keywords：Brucella；bls