第一章 无菌操作技术实践 课件 苏教版选修一.pptVIP

1.下表是几种微生物能利用的碳源和氮源物质的描述，其中描述错误的微生物有几种( ) A.1种 B.2种 C.3种 D.4种 N2 尿素 N2 NH3 氮源物质 葡萄糖 葡萄糖 CO2 CO2 碳源物质 乳酸菌 甲烷氧化菌 圆褐固氮菌 硝化细菌 【解析】选C。硝化细菌属于化能自养型生物，以CO2为碳源，以NH3为氮源。圆褐固氮菌属于异养固氮菌，碳源为含碳有机物，氮源为分子态氮。甲烷氧化菌对碳源要求严格，只能是甲烷或甲醇。乳酸菌属于异养厌氧型菌，其碳源和氮源均为有机物。 2.无菌操作技术是微生物培养及植物组织培养的关键环节之一，其中高压蒸汽灭菌法是最常用的灭菌方法之一，与其他灭菌方法相比，高压蒸汽灭菌法具有 ( ) A.与干热灭菌相比较，高压蒸汽灭菌属于湿热灭菌，其效果不如干热灭菌 B.与消毒技术相比较，高压蒸汽灭菌是用较温和的方法杀死物体内外的绝大多数微生物 C.培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌 D.高压蒸汽灭菌会产生大量水蒸气，热产量大，不易于热量传递 * 第一章 无菌操作技术实践 一、微生物的培养 1.培养基 (1)概念：为人工培养微生物而制备的，提供适合微生物_______ ______或积累____________的营养基质。 (2)种类： ①按照物理状态可分为：_____培养基、半固体培养基和_____培养 基。 ②按化学成分可分为：___________、合成培养基和半合成培养基。 ③按功能可分为：基础培养基、___________、鉴别培养基等。 生长、 代谢产物 液体 固体 天然培养基 选择培养基 繁殖 2.无菌操作与接种技术 ___________ (1)灭菌的方法 干热灭菌 ___________：如高压蒸汽灭菌法 (2)无菌操作与接种技术： ①无菌操作——微生物接种技术的关键： a.培养基、试管、培养皿、接种器械在接种前都需要_____。 b.操作人员及操作环境要求_______。 灼烧灭菌 湿热灭菌 灭菌 消毒 混合平板法：将菌种混合于培养基中________ 斜面划线法：主要用于试管中的___________ 用____________的接种针垂直刺入培养基后拔出 穿刺接种 涂抹平板法：用无菌玻璃刮铲将______涂在培养基表 面 涂抹平板接种 ____________ 划线接种 ②接种技术： 平板划线法 交叉划线 菌种 斜面培养基 倒平板 带有菌种 3.培养基的配制 (1)配制原则：为所培养微生物的________________提供所需的 _______________。 (2)配制过程： 配制培养液→________→分装→包扎→灭菌__________ 。 【点拨】灭菌可杀死所有微生物，消毒只杀死微生物的营养细 胞，常用的消毒方法有70%的酒精消毒、紫外线消毒等。 生长和繁殖 营养物质和条件 搁置斜面 调节pH 二、微生物的分离与计数 1.微生物的分离 (1)原理：根据微生物对____________________等要求的不同， 通过只提供目的微生物生长的必需条件，或加入___________使 非目的微生物不能生长，从而达到________________的目的。 (2)鉴定依据：____________的特征。 涂抹平板法 (3)方法：平板分离法 ___________ 平板划线法 营养成分、氧气、pH 某些抑制剂 选择分离微生物 菌落或菌苔 混合平板法 2.微生物的数量测定 【点拨】微生物计数培养时常设置对照实验：(1)判断培养基是否有杂菌污染，可将未接种的培养基同时进行培养；(2)判断选择培养基是否有筛选作用，可设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养。 鉴别不同种类的微生物，如用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色并带有金属光泽) 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 培养和分离出特定微生物(如分离酵母菌和霉菌，可以在培养基中加入青霉素) 培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 选择培养基 用 途 特 点 种 类 培养基的配制和无菌操作 1.培养基的种类 2.涂抹平板法和混合平板法的异同 (1)过程如图： (2)结果不同： ①涂抹平板法：细菌菌落通常仅在平板表面生长。 ②混合平板法：细菌菌落出现在平板表面及内部。 (3)目的相同：分离各种目的微生物。 3.常见的消毒和灭菌方法 应用范围 灭菌 主要方法 种类 内容 接种工具如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中试管口或瓶口等