1微生物的实验室培养和分离(上新课)2016规范.ppt

平板划线的操作方法 按物理性质划分 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 表面生长 固体培养基：菌落 沉淀生长 均匀混浊生长 半固体培养基： 2、分类： 按用途划分 基础培养基： 鉴别培养基: 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基） 用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，有利于特定微生物的生长，同时抑制其它微生物的生长。如 的培养基。 选择培养基: 用于鉴别不同类型微生物的培养基。微生物产生某种代谢产物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化。如？ 以尿素为唯一氮源、以纤维素为唯一碳源 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红。 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 【例】以下是单克隆抗体制备流程示意图： 根据培养基的________分类，图中HAT培养基属于________培养基 选择 用途 一、培养基 一般都含有 四类物质，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 3、营养成分： 碳源、氮源、水、无机盐 pH 特殊营养物质 O2 例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不 能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、 嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等 的要求。 培养霉菌时：酸性 培养细菌：中性或弱碱性 微生物需要的五大类营养要素物质是： 微生物需要的营养物质及功能 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 ：凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。 ①无机碳源：CO2；CO32-、NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、牛肉膏、蛋白胨、脂肪酸、花生粉饼、石油等 ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源 ⑴.概念 ⑵.来源： ⑶.作用： 1.微生物的碳源 自养微生物 异养微生物 ①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。 2.微生物的氮源 ⑴.概念： ⑵.来源： ⑶.作用： 3.生长因子 ⑶.常见的生长因子： ⑴.概念： ⑵.作用： 微生物生长不可缺少的微量有机物。 酶和核酸的组成成分。 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。 N2 NH3等 有机物中的氮（还有尿素） 无机氮 牛肉膏、蛋白胨 圆褐固氮菌、硝化细菌和大肠杆菌 分析氮源： 3基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 葡萄糖、牛肉膏、 蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： N2、NH4＋、NO3-等 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、 氮源、能源 4.培养基的用途 液体培养基：增菌、工业生产 固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种 半固体培养基：动力检测 划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 化学成分 天然培养基 合成培养基 用途 鉴别培养基 培养基的种类 不加凝固剂 加凝固剂，如琼脂 工业生产 观察微生物的运动、分类鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 培养基成分明确 分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物 在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 鉴别不同种类微生物 选择培养基 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 P84 5. 配制原则 ⑴目的明确： ⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当 ⑶适宜的pH值： 有机碳源 异养型： 根据微生物的种类、培养目的选择原料 自养型： 不加碳源 加入缓冲剂 细菌偏碱，真菌偏酸 （CO2碳源） 生产 科研 自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( ) A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质