丙氨酸氨基转移酶参考品定值方法的初步研究.pdfVIP

中国生物制品学杂志2O02年第15卷第5期 Oain J Bid~ s 2O02。Vo1．15．№．5 ·295· 丙氨酸氨基转移酶参考品定值方法的初步研究‘ 李 勇 孟 泽 史利宁 黄宇烽 张春妮(南京军区南京总医院全军医学检验中心，南京210032) 【摘 要】 目的 研究丙氨酸氨基转移酶参考品活性浓度的定值。方法 用IFCC推荐的方法测定该酶活性 浓度，从9个厂家生产的试剂盒中选择3种，首先进行实际K值的测定，然后对该参考品定值。结果 瓶问变异 c， 小于1．O％。丙氨酸氨基转移酶的催化浓度以95％可信限赋值，复溶的冻干参考品为2o1±4．9U／L。结论 该定值 对于本品的试用和认证是有价值的。 【关键词】丙氨酸氨基转移酶 酶参考品 定值 判断肝实质细胞损伤的重要指标之一是血清丙 日立7150型全自动生化分析仪。 氨酸氨基转移酶(脚 )的升高。ALT测定广泛用于 3．待定值样品 健康体检、流行病学调查、临床诊断、治疗和病程监 本室研制的邶 冻干品，均为 ll玎1分装。使用 测、药理的毒性研究等。目前众多临床实验室结合 前用 lInl蒸馏水复溶。 自动生化分析仪普遍应用酶动力学方法的试剂盒， 4．试剂盒选定 并使用与仪器和试剂相配套的酶校正品。1985年 从原理相同、组成成分相同的9种肿 试剂盒 IFCC提出了AIJT的推荐方法…，推进了国际间 ALT 中(不含5’一磷酸吡哆醛，PLP)，对照 C配方及 测定标准化的工作，我国也于 l995年讨论通过了 预实验结果选择3种(亚太、中生、Randox)。 脚 的推荐方法(草案)【2J，从而提高了酶测定的准 5．实测ALT的K值 J 确性和精确性，也使测得结果在方法间、实验室间有 校正生化分析仪实测ALT的K值，以葡萄糖标 了可比性。现在各试剂厂商生产的脚 试剂盒种 准液为样品，用己糖激酶法试剂盒测定葡萄糖。由 类繁多，使实验室选择有较大空间。为了保证工作 已知浓度葡萄糖反应生成的等摩尔浓度的NADH在 质量，选用合适的试剂盒就显得尤为重要。有些实 340rim吸光度，换算成实测NADH的￡，再由￡及相 验室使用了进口含酶校正品，推进了酶测定标准化 应试剂盒的参数计算邶 的K值。重复测定6次， 的进程，但仍有许多实验室尚未用上酶校正品，更无 求同一仪器上各试剂盒实测K值的 、S及CV％。 酶标准品。我们已经从猪心提纯了A工T，研制成具 6．均质性评价 有比例互换性和稳定的 脚 参考品。现报道对其 取 l6瓶酶冻干样品，在2d中，每天复溶 8瓶， 初步定值的方法。 每瓶重复测定3次(在3批中)，按双因素方差分 析 求瓶间、瓶内和天间变异。 材料与方法 7．ALT的定值 1．试剂 均质性实验2d中各复溶8瓶冻干品，用后分别 葡萄糖测定试剂盒(己糖激酶法)，Randox公司 混合成2瓶样品供定值用。用上述3种试剂盒分别 产品；葡萄糖标准液(5．55muM／I )，北京北化精细化 测定。在2d中，每天测定 1瓶，重复测定3次(在3 学品公司产品；脚 测定试剂盒：北京中生、宁波亚 批中)。按试剂盒说明书设置分析参数，37℃测定， 太、英国 Ran~x、上海申能、日本第一化学、瑞士 根据实测K值代人计算式，计算酶活性。 Roche公司、台湾元生、德国Labo和匈牙利Diagn