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俄罗斯耐寒月季的快繁技术研究 　　摘 要：俄罗斯耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”，是1个全新的耐寒月季品种，颜色艳丽，抗寒能力强。具有极高的观赏价值和优良性状。本实验以Rosa“Clair Renaissance”茎段为外植体，通过植物组织培养手段建立快速繁殖。结果表明，组织培养技术对于耐寒月季迅速普及有着重要作用。该试验获得成功，丰富了东北地区的耐寒花卉品种。 　　关键词：俄罗斯耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”；组织培养；耐寒月季新品种；快速繁殖 　　中图分类号：S685.12 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160230029 　　俄罗斯耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”，是一个全新的耐寒月季品种，花朵大，可达10cm，花瓣多，层次分明，叶片多，品质好，颜色艳丽，植株高1.5m，可在-35℃自然越冬，极具观赏性。 　　我国东北地区，冬季寒冷干燥，春季风沙大，温度低，这些气候条件使大部分花卉不能在陆地自然越冬，用于城市绿化的花卉尤为匮乏。目前，耐寒月季已经作为一种全新的绿化材料应用于东北地区绿化。但是单一的花色品种已经远远不能满足城市绿化的需求，因此为解决花卉资源贫乏，品种单一，经过对同纬度地区耐寒花卉的考察研究，从俄罗斯引进耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”来保存和丰富北方地区绿化品种。经过3a驯化实验，该月季品种抗寒，抗旱性强，生物学表现良好，随着对月季种植需求量的增加，一些新培育和引进的优良品种，只靠扦插繁殖种苗，繁殖速度受到很大限制，短期内难以推广。而进行组织培养快繁技术研究 ，为完善规模化生产提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 外植体建立 　　材料为驯化3a的俄罗斯耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”。选取带芽茎段的最佳时期是5月份。最理想的材料是当年生半木质化枝条中饱满而未萌发的侧芽。将采回的枝条去叶，然后进行灭菌处理，通常采取先用带消毒水的毛刷洗刷，洗刷后用无菌蒸馏水冲洗1～2h，使消毒水彻底清除。在无菌环境下，将处理好的枝条剪成带腋芽的茎段，每茎段大约在1.5cm右。将裁剪好的茎段放入70%的酒精溶液内浸泡2min，取出茎段经无菌蒸馏水多次冲洗后（清除残留茎段上的酒精即可）在置于0.1%的升汞溶液中进行15min的消毒处理。然后再用无菌蒸馏水进行冲洗3～5次，使茎段上的升汞溶液清除干净后，用无菌滤纸将茎段吸干便可开始接种。 　　1.2 耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”离体牙诱导培养 　　将处理好的无菌茎段分别接种于不同诱导培养基上，分别进行诱导萌芽，每瓶接入4～5个外植体。本次实验共设计5组诱导培养基，其中都是以MS为基本培养基，然后加入不同浓度的生长素和细胞分裂素，根据正交实验设计方法，添加不同量的6-BA和不同浓度的NAA进行配比试验。接种后在恒温培养间内培养4周，然后进行统计离体芽的诱导分化率。 　　培养基的组成： 　　MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.10mg/L 　　MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L 　　MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.20mg/L 　　MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L 　　MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L 　　1.3 耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”丛生芽继代增殖培养 　　在超净工作台内，将经过诱导培养的耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”的嫩芽剪下，重新转接至4种不同浓度的细胞分裂素和生长素的继代培养基中进行继代增殖。此次每瓶培养基内转接嫩芽数为5～10株且每株嫩芽芽茎长度为1～2cm左右，经过两周培养后，统计丛生芽的数量以及高于1cm的芽数。 　　代培养基为： 　　MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L 　　MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L 　　MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L 　　MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L 　　1.4 耐寒月季Rosa“Clair Renaissance”试管苗生根培养 　　将生长健壮，高度为3cm的丛生苗，切单株接入到生根培养基中，每种培养基中转接5～10颗单株。共6种生根培养基配方。转接培养15d后，观察并统计转接后单株试管苗生根情况。 　　生根培养基为： 　　1/2MS+NAA0.10mg/L 　　1/2MS+IBA0.10mg/L 　　1/2MS+NAA0.20mg/L 　　1/2MS+IBA0.20mg/L 　　1/