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mRNA的剪接——剪接体的生成 剪接体(splicesome):是由细胞核小分子核糖核蛋白颗粒(snRNP)与hnRNA结合,使内含子形成套索并拉近上、下游外显子距离的复合体。 hnRNA 蛋白 snRNA 【U1、U2、 U4、U5、U6 】 snRNP 剪接体 (splicesome) 成熟mRNA 剪接体组分 套索 切下的内含子 剪接过程 内含子 外显子1 外显子2 hnRNA 中间产物 成熟mRNA 降解 第一次转酯反应 第二次转酯反应 内含子的切除(动画) 五、真核生物转录后的加工 3. mRNA编辑(mRNA editing) RNA编辑是指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。具体说来,指基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息现象。 人类载脂蛋白B(apoB)基因的mRNA编辑 [肝脏] [小肠] 脱氨基 真核mRNA转录后加工(动画) 五、真核生物转录后的加工 (三)tRNA转录后的加工 1. 剪切与剪接 RNase 剪切 剪接 五、真核生物转录后的加工 (三)tRNA转录后的加工 2. 添加:添加3氨基酸臂-CCA tRNA核苷酸 转移酶、连接酶 ① ② ③ ④ 五、真核生物转录后的加工 (三)tRNA转录后的加工 3. 修饰 ① 甲基化:G?mG ② 还原:U? DHU ③ 脱氨: A? I ④ 转位: U?Ψ 稀有碱基结构示意图 五、真核生物转录后的加工 (四)rRNA转录后的加工 1. 甲基化:发生于45s rRNA 2. 剪切: 45S ? 41S 20S ? 18S 32S ? 28S—5.8S 28S 5.8S (真核生物) DNA 转录 真核rRNA的加工过程 甲基化 甲基化群 剪切 45S rRNA 成熟rRNA 主 要 内 容 一、转录的体系及其特点 二、原核生物的转录过程 三、真核生物的转录过程 四、真核生物转录后的加工 五、核酶 六、复制与转录的异同点 六、核酶 (ribozyme) ——具有催化活性的RNA 。 绿色部分:外显子 黄色部分:内含子 四膜虫rRNA的二级结构图 自然界存在的七类核酶: 第一类内含子(group I intron) 第二类内含子(group II intron) RNase P的RNA 亚基(RNA subunit of RNase P) 锤头型核酶(hammerhead Ribozyme) 发夹型核酶(hairpin ribozyme) 肝炎δ病毒(hepatitis delta virus,HDV)核酶 VS核酶( Neurospora Varkud satellite ribozyme) 最简单并具有催化活性的锤头型核酶结构 切割位点 六、核酶 (ribozyme) (三)核酶研究的意义 核酶的发现是对传统酶学的挑战,打破了酶是蛋白质的传统观念; 利用核酶的结构设计合成人工核酶,为治疗肿瘤等疾病提供新的手段。 粗线表示合成的核酸分子 细线表示天然的核酸分子 X 表示一致性序列 箭头表示切断点 人工设计的核酶 主 要 内 容 一、转录的体系及其特点 二、原核生物的转录过程 三、真核生物的转录过程 四、真核生物转录后的加工 五、核酶 六、复制与转录的异同点 七、复制与转录的异同点 (一)相同点 需要DNA模板 遵循碱基配对原则 聚合反应形成磷酸二酯键 合成方向为5?3 七、复制与转录的异同点 (二)不同点 DNA复制 RNA转录 模板 两条链为模板 其中一条链为模板 合成方式 半保留复制 不对称转录 聚合酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶 原料 dNTP NTP 碱基配对 A:T/G:C A:U/G:C 引物 需要 不需要 产物 双链DNA 单链RNA 本 章 的 主 要 内 容 一、转录的体系及其特点 二、原核生物的转录过程 三、真核生物的转录过程 四、真核生物转录后的加工 五、核酶 六、复制与转录的异同点 * 非依赖r因子的转录终止模式 反向重复序列 反向重复序列 使RNA聚合酶变构,转录停顿 使转录复合物趋于解离,RNA产物释放 RNA-pol RNA-pol 原核生物转录过程总结 1 2 3 4 5 6 7 主 要 内 容 一、转录的体系及其特点 二、原核生物的转录过程 三、真核生物的转录过程 四、真核生物转录后的加工 五、核酶 六、复制与转录的异同点 四、真核生物的转录过程 (一)转录起始 真核生物的启动子有三类,分别由RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ转录。转录起始时,RNA聚合酶需要与辅助因子结合后才能结合模板,其起始过程比原核生物复杂。 这里重点介绍真核生物RNA聚合酶 I
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