疫苗的制备选编.pptxVIP

疫苗如何制备 梁静茹 罗飞 罗亚辉 张萌 疫苗主要指将病原微生物（细菌、病毒、真菌、立克次氏体、支原体、衣原体等）及其代谢产物，经过人工减毒、灭火或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的免疫佐剂，例如流感疫苗、乙肝疫苗、霍乱疫苗等。 疫苗的产生 天花（Smallpox） 由天花病毒引起的一种烈性传染病 天花病毒：呈砖形，能对抗干燥和低温，在痂皮、尘土和被服上可生存数月至一年半之久 临床表现：主要为严重毒血症状、皮肤成批依次出现斑疹、丘疹、疱疹、脓疱，最后结痂、脱痂，遗留痘疤。 传播途径：飞沫吸入或直接接触。 特点：发展迅速，未免疫人群感染后 15-20天内致死率高达30％。 疫苗的产生 天花的防治——中国 宋真宗时期（998- 1023年） ：人痘法， 吸入天花病人痂粉预防天花。 明朝隆庆年间（1567-1572年）：痘衣法、痘浆法、旱痘法和水苗法等多种接种方法出现。 清朝顺治死于天花，得过天花的康熙继位 人痘法的缺点：有时也会引起严重的天花 疫苗的产生 天花的防治——欧洲 1721年，人痘接种法传入英国 1796年，英国医生E. Jenner 利用牛痘防治天花 1798年，医学界正式承认“疫苗接种确实是一种行之有效的免疫方法”。 细胞培养法获得天花病毒——牛痘苗 Jenner是牛痘的发明者，但Jenner并不清楚为什么牛痘能够预防天花。1870年，法国科学家Pasteur在对鸡霍乱病的研究中发现，将鸡霍乱弧菌连续培养几代，可以将细菌的毒力降到最低，给鸡接种这种减毒细菌后，可使鸡获得对霍乱的免疫力，从而发明了第一个细菌减毒活疫苗——鸡霍乱疫苗。Pasteur将此归纳为对动物接种什么细菌疫苗就可以使其不受该细菌感染的免疫接种原理，从而奠定了疫苗的理论基础。因此，人们把法国科学家Pasteur称为疫苗之父。 疫苗的产生 疫苗之父---法国免疫学家 Louis Pasteur 鸡霍乱弧菌减毒株（第一个细菌减毒活疫苗） 疫苗及其技术的发展简史 减毒活疫苗制备——第一次疫苗革命 基因重组疫苗技术——第二次疫苗革命 反向疫苗学技术——第三次疫苗革命 减毒活疫苗制备（卡介苗）——第一次疫苗革命 Calmette和Guerin将一株从母牛分离到的牛型结核杆菌在含有公牛胆汁的培养基上连续培养230代，经过13年后获得了减毒的卡介苗（BCG），这种菌苗首先使敏感动物豚鼠不再感染结核杆菌。卡介苗于1921年首次给一名新生儿经口服途径进行免疫，婴儿服用疫苗后无任何副反应。这名婴儿在其母亲死于肺结核病后虽与患有结核病的外祖母一起生活，与结核杆菌有密切接触，但是在他的一生中却没有患结核病。由于卡介苗既安全又有效，到了20世纪20年代末，在法国已有5万婴儿服用了卡介苗。此后，卡介苗的使用由口服改成皮内注射。从1928年开始，卡介苗在全世界广泛使用，至今已在182个国家和地区对40多亿的儿童接种了卡介苗。 人为处理使病原微生物失去毒力或降低毒力 用无毒卡介菌（结核菌）人工接种进行初次感染，经过巨噬细胞的加工处理，将其抗原信息传递给免疫活性细胞，使T细胞分化增殖，形成致敏淋巴细胞，当机体再遇到结核菌感染时，巨噬细胞和致敏淋巴细胞迅速被激活，执行免疫功能，引起特异性免疫反应。 基因重组疫苗技术——第二次疫苗革命 1986年应用基因工程制备的乙型肝炎表面抗原获得成功，并正式作为乙肝疫苗用于临床，成为最具典型意义的第二次疫苗革命的产物。最初的乙肝疫苗是从乙肝表面抗原阳性的携带者血浆中提取的，这对接种乙肝疫苗的健康人群来讲其危险性是显而易见的。将乙肝表面抗原的基因克隆到酵母菌等真核细胞中，其表达的抗原分子具有和血源疫苗一样的结构和免疫原性。用基因重组制备乙肝疫苗，生产简单、快速、成本低。乙肝基因重组疫苗不仅安全、效果好，而且可以源源不断地供应临床，不必像乙肝血源那样担心阳性血浆的来源和供应问题。 基因重组技术研究相关基因和蛋白质产物 反向疫苗学技术——第三次疫苗革命 2000年6月26日美国Celera公司等宣布人类基因组测序的完成，标志着人类进入了后基因组时代。随着这个时代的到来，生物科学从基因组学到蛋白质组学的新的研究模式已经初步形成，疫苗研究也开始改变过去从表型分析入手的思维方式，而是从全基因水平来筛选具有保护性免疫反应的候选抗原。这种以基因组为基础的疫苗发展策略，有人称之为反向疫苗学。 反向疫苗学技术主要包括三个技术步骤： 基因组信息分析结合基因芯片筛选候选疫苗成分 高通量基因重组表达候选疫苗蛋白成分 免疫保护性检测 疫苗 组成 作用原理 类型与特点 组成 疫苗的组成：具有免疫保护性的抗原如蛋白质、多肽、多糖或核糖等与免疫佐剂混合制备而成。 抗原是指能刺激机体产生免疫反应的物质