植物逆境生物学干旱抗性机制讲义.pptVIP

1988年,Ager 研究小组从人的红细胞膜上分离得到CHIP28 蛋白, 随后他们用爪蟾卵母细胞表达系统证实 CHIP28 具有水通道功能,第1次从分子水平上证实蛋白质介导水分的跨膜转运(Denker等1988;Preston等1992)。1997年被基因组命名委员会重命名为AQPl。 在植物中第一个水孔蛋白γ-TIP是由Maure等(1993)从拟南 芥中分离出来的。 （1）水孔蛋白的发现 （2）植物水孔蛋白的种类 植物水孔蛋白根据序列同源性可以分为四类: PIP (质膜内在蛋白) TIP (液泡膜内在蛋白) NLM蛋白 (根瘤菌共生膜上的内在蛋白，nodulin 26 like MIPs, NLM)。 SIPs （小分子碱性内在蛋白） 植物AQP的分类、细胞定位和运输选择 基因类型 亚类 细胞定位 运输选择性 PIPs PIP1、 PIP2和PIP3 质膜 水、CO2、甘油和甘氨酸 TIPs α、β、γ、δ和gTIP 液泡膜 水、氨水、尿素和H2O2 NIPs NOD26和LIP2 质膜、细胞内膜 水、甘油、尿素、硼 SIPs SIP1和SIP2 内质网 水及其他小分子 酸和硅等 （3）植物水孔蛋白的结构 AQP以四聚体形式存在，而每个单体形成独立的水通道。每个AQP单体都含有由5个短环(loop)相连的6个亲水的跨膜α螺旋。N端和C端伸入细胞质，B、D环位于细胞内，A环、C环及E环在细胞外。B环和E环各含有高度保守的氨基酸序列：天冬酰氨-脯氨酸-丙氨酸(Asn-Pro-Ala NPA)，各自形成半个跨膜螺旋(HB、HE),参与水孔蛋白活性调节。 当两个NPA序列以不同方向的180o相对折叠时，则在脂双层中间形成狭窄的通道，就是水孔通道，形如水漏。 水漏模型” (hour-glass model) 水的输送跨膜与氢键的破坏有关,HB 和HE 两个螺旋以及相邻的NPA 上的Asn 残基对于水的输送过膜起着关键性的作用。 由于AQP1 孔螺旋的偶极距产生的正静电场吸引接近膜中心的水分子的氧,使之靠近NPA 基序。 AQP1 孔在膜中心收紧,在膜的两侧表面张开。这样的结构提供了一个高的介电障碍层以排斥离子,而同时允许中性溶质通过。 （4）水孔蛋白转运水的机理 水分子中的氧与氨基酸基团形成氢键,而代替相互之间形成的氢键。 在水的单列队中,这个水分子无法与相邻的水分子形成氢键；同时由于孔内是疏水的,水分子也无法与孔壁形成氢键,此时水分子过膜的能垒最低。 1)介导水分的快速跨膜转运 （5）植物水孔蛋白的功能 植物许多生理过程的发生需要大量的水分子快速进出细胞, 如种子萌发、根及下胚轴的伸长以及韧皮部的物质转运。许多植物不同部位都分布有水通道蛋白,流经根中的水有70%-90%通过水通道蛋白来传输。 水孔蛋白的主要功能是通过增加渗透势或水力学导度来增加跨膜水流速率。 如拟南芥AtPIP2;2在根中优势表达, 其突变体根部皮层的导水力下降25%一30% 。抑制烟草质膜NtAQP1的表达, 导致根细胞的导水力下降55%。 2)参与气孔运动 拟南芥AthH2基因在气孔保卫细胞中高效表达；向日葵SunTIP7和SunTIP2O在保卫细胞中表达，前者在气孔关闭时表达上调， 后者表达量保持不变(Sarda等1997)。蚕豆(Vicia faba)BBAQ1在蚕豆保卫细胞中专一表达，而在其他表皮细胞中几乎没有表达(Sun等2001)。上述研究表明水孔蛋白参与气孔的运动。 保卫细胞膜上的水孔蛋白可能作为渗透压感受器，而与某些离子通道(如K 、C1-)相耦联(MacRobbie 2006)。在低渗条件下，内向水流通过液泡膜上的水通道，促使水孔蛋白构象发生改变并激活与之耦联的离子通道，导致保卫细胞液泡内大量离子外流，细胞收缩引发气孔关闭。 3）参与叶肉内CO2的运输 Terashima和Ono(2002)报道,在HgC12存在下叶肉细胞对CO2的导度(inetmal CO2 conduet