益智胶囊对大鼠脑弥散性缺血再灌注后海马CA1区神经元迟发性死亡的影响.pdfVIP

益智胶囊对大鼠脑弥散性缺血再灌注后海马 CA1 区神经元迟发性死亡的影响 孙莉莎 欧阳石 李琳 徐江平 第一军医大学药理学教研室 广州 510515 广东 摘要 目的 观察益智胶囊对大鼠全脑缺血后海马CA1区神经元迟发性死亡及学习功能的影响 方法 使用四血管闭塞 4-VO法制成大鼠急性全脑缺血再灌注模型 采用免疫组织化学方法计数脑缺血再 灌注脑损伤后 1 2 4 8及40d后 大鼠海马CA1区正常神经元数量 并用Morriss水迷宫观察脑 缺血再灌注脑损伤后 40d时各组大鼠的学习记忆功能 结果 从缺血再灌注后第 2d起 益智胶囊 100mg/kg组大鼠海马CA1区正常神经元数量明显多于缺血对照组大鼠海马CA1区正常神经元数量 差异有明显统计学意义 P0.01同时 MORRIS水迷宫法检测全脑缺血再灌注脑损伤后40d时各组 大鼠记忆功能 益智胶囊 100mg/kg组大鼠明显好于缺血对照组大鼠 P0.01结论 益智胶囊 对全脑缺血后大鼠海马CA1区神经元具有保护作用 并可改善大鼠的记忆功能障碍 关键词 益智胶囊 脑缺血/再灌注 迟发性神经元死亡 学习记忆障碍 脑血管疾病已成为人类死亡的三大病因之一 严重威胁着人类的健康 近年来 随着人们对脑缺 血后神经元损害及其病理生理机制的深入研究 人们认识到缺血性神经元损害不是单一的病理损害过 程 并由此提出了脑损伤级联反应的概念 此概念包括了兴奋性神经毒作用 自由基毒性作用 Ca2+ 超载 线粒体功能障碍 程序性细胞死亡 凋亡 等多种机制 它们由缺血 缺氧引起 发生在不同 的时间点上 彼此重叠且相互联系 共同造成神经元的损害 1 3 因此 当前进一步寻找脑缺血后神 经保护剂的目标是 针对损伤级联反应的不同环节 寻找有效药物以期打断级联反应 保护神经元以 减少缺血造成的损害 众所周知 中药复方由于具有多靶点作用的药理学特点 在缺血性脑损伤的 治疗中无疑有一定的潜在优势和价值 因此 从中医药中寻找新的治疗药物已经 日益为众多研究者所重视 益智胶囊(Compound Yi Zhi ,CYZ) 主要是由首乌 人参 淫羊藿等经现 代科学方法提取其有效成分而成 其中可定量的有效成分达到50 % 以上 具有补气安神 益智养精 补肾助阳之功效 本实验中 我们初步观察了益智胶囊对缺血性脑损伤后大鼠海马 CA1 区神经元迟 发性死亡及学习记忆功能的影响 对益智胶囊治疗缺血性脑血管病的药理学作用进行了初步的探讨 1. 材料与方法 1.1 实验动物及分组 ___________________________________________ 基金项目 国家863 计划新药博士基金 2003AA2Z3535 孙莉莎 女 汉族 1966 年生 第一军医大学药理学教研室实验师 主要从事心脑血管和神经药理学研究 联系电话 020 通讯作者 徐江平 男 1967 年7 月出生 药理学博士 现为第一军医大学药理学教研室主任 副教授 主要从事脑血管和神经药理 学研究 Tel 020E-mail: xujp@ 清洁级成年雄性SD大鼠 第一军医大学实验动物中心提供 体重200250g建模后随机分为 下列各组 缺血对照组 益智胶囊低剂量 50mg/kg 组与益智胶囊高剂量 100mg/kg 组 每组30 只大鼠 各组再分为再灌注后1 2 4 8及40d 5个时间点 每时间点各6只大鼠 1.2 大鼠全脑缺血模型制作 4 5 参照有关文献 介绍的方法采用改良四血管闭塞 4-VO法制成大鼠急性全脑缺血再灌注模型 具体方法为 大鼠以戊巴比妥钠 30mg/kgb.w.麻醉后 取颈后正中切口 在手术显微镜下暴露第 一颈椎双侧翼孔 微型钻扩大翼孔 以双极电凝镊插入翼孔电凝双侧椎动脉 使其永久闭塞 缝合伤 口 笼养24 hr 后同样方法麻醉 颈前正中切口 暴露双侧颈总动脉 头顶部皮下插入针状电极行脑 电监测 用无损伤动脉夹迅速夹闭双侧颈总动脉 造成全脑缺血 15 min 后撤去动脉夹 开始再灌注 模型成功的标准为出现静息脑电波 不合标准者不列入实验动物总数 1.3 益智胶囊药物制备及给药途径 益智胶囊 CYZ 由首乌 人参 淫羊藿等中药组方配制 由第一军医大学