第13章基因表达调控-2008级-唐旭东.pptVIP

第13章 基因表达调控 Regulation of Gene Expression 第一节基因表达调控的基本概念 基因表达是基因转录及翻译的过程，即：生成具有生物学功能产物的过程。 基因表达是受调控的 并非所有基因表达过程都产生蛋白质 基因表达水平的高低不是固定不变的 第三节  原核基因表达调节 第四节  真核基因表达调节 一、真核基因组具有独特的结构特点 （一）真核基因组结构庞大 哺乳类动物基因组DNA 约 3×109碱基对 （二）真核基因转录产物为单顺反子 单顺反子(monocistron) 即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 siRNA 和miRNA的相同点 非编码小分子RNA 由Dicer切割产生 长度22个碱基左右 与一些蛋白形成RISC复合体 与mRNA作用引起基因沉默 六、转录后水平的调节也是基因表达调控的重要环节 （自学内容） （一）hnRNA加工成熟的调节 （二）mRNA运输、胞浆内稳定性的调节 加工过程包括加帽、加尾、剪接、碱基修饰和编辑等。 通过与蛋白质结合形成核蛋白体复合物(ribonucleoprotein, RNP)进行。 七、基因表达在翻译水平以及翻译后阶段仍然可以受到调节 （一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行（自学） （二）RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节 （自学） （三）对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达（自学） *一大家族小分子非编码单链RNA （四）小分子RNA对基因表达的调节十分复杂 1．微小RNA (microRNA, miRNA) *特点： 长度一般为20~25个碱基； 在不同生物体中普遍存在； 其序列在不同生物中具有一定的保守性； 具有明显的表达阶段特异性和组织特异性； miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，大多位于基因间隔区。 是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过Dicer酶切机制，转变为具有特定长度(21~23个碱基)和特定序列的小片段RNA。 双链siRNA参与RNA干扰沉默复合体 （RNA interference silencing complex ，RISC）组成，与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。 由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉或RNA干扰(RNA interference，RNAi)。 2．小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA) 30bp 双链RNA（dsRNA） 水解生成 21-23个碱基 siRNA 3’ 3’ 5’ 5’ RISC形成 识别特异序列 并使其降解 RNA干扰作用机制 Dicer酶 发育过程的调节 抑制转座子活性和病毒感染 生物学效应 不需完全互补 需完全互补 靶mRNA 结合 阻遏其翻译 降解mRNA 功能 单链分子 双链分子 结构 内源发夹环结构的转录产物 内源或外源长双链RNA诱导产生 前体 miRNA siRNA siRNA 和miRNA的差异比较 mRNA 阻遏蛋白 I DNA Z Y A O P pol 没有乳糖存在时 （二）乳糖操纵子受阻遏蛋白和CAP的双重调节 阻遏基因 1.阻遏蛋白的负性调节 mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 图13-4 lac 操纵子与阻遏蛋白的负性调节 + + + + 转录 无葡萄糖，cAMP浓度高时 有葡萄糖，cAMP浓度低时 2. CAP的正性调节 Z Y A O P DNA CAP CAP CAP CAP CAP CAP 3. 协调调节 ※当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； ※如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 *单纯乳糖存在时,细菌利用乳糖作碳源； *若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。 葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏(catabolic repression)。 细菌优先利用葡萄糖作为能源 有葡萄糖： cAMP 阻止cAMP 与CAP结合 CAP无活性 不促进转录 无葡萄糖： cAMP CAP有活性 促进转录 mRNA 低乳糖时 高乳糖时 葡萄糖低 cAMP浓度高 葡萄糖高cAMP浓度低 RNA-pol O O O O *lac操纵子强的诱导作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖 乳糖操纵子调控方式的比较 负调控 正调控 调节蛋白