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血小板抗体检测血液科篇4稿
血小板抗体检测和交叉配型项目推广要点(血液病科)
一、临床背景
目前已知由于血液病患者在疾病发生、进展或治疗过程中,往往存在严重的血小板减少,导致患者出现严重的出血症状,所以临床医生对此类自身免疫性疾病的诊断以及如何采取有效的治疗性血小板输注,防止出血越来越重视。在临床诊疗中安全、合理、科学、有效的血小板输注是提升血小板计数,防止出血,保障患者生命安全的有效措施。然而,目前我国大多数血小板输注仍然采用随机输注(即“盲输”),不相合的血小板输入患者体内后迅速被机体免疫系统破坏清除,导致血小板输注无效症频繁发生,不仅浪费了宝贵的血小板资源,而且延误了患者的最佳治疗时机,还增加了患者痛苦和经济负担。
二、在血液病科开展血小板抗体检测和交叉配型的临床意义
1.预防血小板输注无效症的发生:通过对患者进行血小板抗体筛查和与血小板供者的交叉配型试验,筛选和患者血小板抗原配合性高的血小板供者,以提高血小板输注有效率,防止血小板输注无效症的发生。
2.自身免疫性疾病的辅助诊断:检测患者血清和血浆中自身血小板抗体的水平和特异性,可辅助诊断自身免疫性疾病如白血病、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合症、血小板减少症、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、特发性血小板减少性紫癜等。
3.药物性抗体的检测:某些药物的存在如肝素、奎宁、奎尼丁、环磷酞胺、甲氨蝶呤、阿司匹林、水杨酸钠等,选择性的抑制了骨髓巨核细胞造血功能,使血小板的生成减少,同时应用某种药物后,产生药物相关抗体,药物抗体复合物附着血小板膜上与补体结合,使血小板聚集破坏,一些药物进入人体后也可直接破坏血小板,造成血小板破坏增多,从而引发血小板减少。
三、应用科室
输血科(首选),检验科,血液病科实验室,中心实验室
四、检测方案
1.血小板输注前的检测:包括血小板抗体筛检试验和血小板交叉配合试验。
2.自身免疫性疾病的辅助诊断:检测患者血清和血浆中患者自身血小板抗体的水平和特异性,可辅助诊断自身免疫性疾病如ITP患者。
3.药物性抗体的检测:在血小板抗体筛检试验中加入可疑药物,可对药物性抗体引起的血小板减少做出明确判断。
五、检测内容
1)血小板同种异体抗体检测:检测患者血清或血浆中是否含有血小板抗体,包括HLA抗体,HPA抗体及其它血小板反应性抗体。患者样本要求是72小时内血清样本或EDTA或枸橼酸钠抗凝血浆样本,无溶血,无乳糜,无杂物。
2)血小板自身抗体检测:检测患者自身血小板结合抗体和自身游离抗体。患者样本要求是8小时内EDTA或枸橼酸钠抗凝全血,室温(18℃~25℃)放置,无溶血,无乳糜,无杂物。
3)药物性抗体的检测:检测患者血清或血浆中是否含有血小板药物性抗体,患者样本要求是72小时内血清样本或EDTA或枸橼酸钠抗凝血浆样本,无溶血,无乳糜,无杂物。
4)血小板交叉配型:采用多个供者血小板与患者进行交叉配型,为患者筛选相容性血小板进行输注,减少血小板输注无效症的发生。患者样本要求是72小时内血清样本或EDTA或枸橼酸钠抗凝血浆样本,无溶血,无乳糜,无杂物。
六、临床治疗方案参考
与血小板抗体相关的血小板免疫性疾病的治疗推荐使用大剂量丙球或糖皮质激素。治疗方案应结合患者及其它合并症综合考虑。有出血倾向者推荐以下治疗方案:
(1)轻微出血倾向:使用激素者维持之前用量。
(2)明显出血倾向:起始剂量为泼尼松 10~20 mg/d,起效后逐渐减至维持量 5~10 mg。
(3)首次诊断者出现明显血小板减少及出血倾向:起始剂量为泼尼松 0.5~1 mg/(kg·d),血小板计数维持(20~30)×10 9 /L以上且出血倾向改善后 2 周可逐渐减量。
(4)严重出血倾向:期待快速起效时,可考虑大剂量的丙球0.4 g/(kg·d)持续 3~5 d,或甲基泼尼松龙 1 g/d持续 3 d,同时可输注血小板。
(5)糖皮质激素和丙球可同时使用。
七、血小板抗体检测和交叉配型项目
检测原理:采用先进的固相红细胞吸附试验技术(solid-phase red cell adherence, SPRCA),反应板中已包被抗血小板单克隆抗体,血小板悬液经离心洗涤后可在反应孔底部形成血小板单层。加入血清或血浆,在孔中经过孵育后,若该血清或血浆中含有血小板抗体,则该抗体与反应孔中的血小板单层结合,未结合的成分通过洗涤被去除。加入抗人IgG及人IgG致敏红细胞(指示红细胞),经离心后指示红细胞通过抗人IgG的桥连与血小板单层上的血小板抗体结合,因此阳性反应为指示红细胞平铺在反应孔底部表面。而阴性反应为指示红细胞在离心力的作用下聚集于反应孔底部中央。示意图如下:
该方法不仅可以进行血小板抗体定性检测(包括同种异体抗体和自身抗体),还可以进行血小板交叉配型。该方法灵敏度高,特异性好,
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