第11章+转录.pptVIP

第十一章 RNA的生物合成（转录） RNA Biosynthesis, Transcription 中心法则 生物体遗传信息传递的方式 转录（transcription） 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 复制 VS 转录 转录与复制的共同点 转录与复制的区别 基本内容： 第一节：转录的反应体系 （基本概念和酶、各种因子） 第一节  转录的反应体系 参与转录的物质 原料：核苷酸（NTP：ATP, UTP, GTP, CTP） 模板：DNA 酶：RNA聚合酶（RNA polymerase, RNA-pol） 转录因子（transcription factor, TF） 凡是转录过程必需的蛋白质，只要它不是RNA聚合酶的组成成分，就可以将其定义为转录因子 转录的模板 结构基因（structural gene）: DNA分子上转录出RNA的区段 转录的模板 结构基因（structural gene）: DNA分子上转录出RNA的区段 模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链 转录的模板 结构基因（structural gene）: DNA分子上转录出RNA的区段 模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链 编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 模板链、编码链与RNA的关系 不对称转录(asymmetric transcription) 在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录 ； RNA聚合酶 原核的RNA聚合酶 核心酶与σ亚基 原核RNA聚合酶的 σ亚基能识别启动子 σ亚基在转录开始后脱离核心酶 核心酶完成后续的转录过程 真核生物RNA聚合酶 真核生物的RNA聚合酶 模板上酶的辨认、结合 操纵子（operon） 通常由结构基因和多种表达调控元件在基因组中成簇串联组成。构成了原核生物中最常见的表达调控单位 启动子(promoter) 启动子:RNA聚合酶结合模板DNA的部位 RNA聚合酶保护法 一种巧妙的研究启动子序列的方法 原核生物启动子保守序列 真核生物启动子保守序列 真核生物的转录起始上游区段比原核多样化 小结： 转录体系：模板（DNA）、原料（4种NTP）、RNA聚合酶、其它转录因子 不对称转录：基因DNA双链中只有其中之一作为模板（模板链） 模板链：参与转录，指导生成RNA的单链 编码链：与模板链互补，与新生成的RNA仅有T与U的区别 小结： RNA聚合酶（RNA-pol）：识别起始部位、解链、聚合、识别终止部位 原核生物的RNA聚合酶： 核心酶： α2β β’ σ亚基 真核生物的RNA聚合酶： I……45S rRNA（18S rRNA, 5.8S rRNA, 28S rRNA） II……hn RNA（mRNA前体） III……各种小RNA（snRNA，tRNA） 第二节  转录过程 转录的过程 转录起始 RNA的延长 转录终止 原核生物转录的过程 转录起始需解决两个问题： 原核生物的转录起始 RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合 原核生物转录的延伸 ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移 转录空泡(transcription bubble) 超螺旋是转录的一个重要特征 原核生物转录的延伸 原核生物转录过程中的羽毛状现象 原核生物转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依赖 Rho因子的转录终止 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 茎环结构使转录终止的机理 回文序列导致RNA形成茎环结构 改变了RNA-pol的构象，使其停顿 RNA和DNA各自形成双链，使RNA/DNA杂化短链分开，释放RNA 小结(原核生物转录过程的)： 起始： σ因子负责辨认转录起始位点 启动子：RNA聚合酶识别、结合、起始转录的DNA序列（如，TATA box） 延长：核心酶 核心酶（α2ββ’） 终止： 依赖ρ因子 非依赖ρ因子 终止子：DNA序列上回文结构 真核生物的转录起始 真核生物转录起始十分复杂，往往需要多种蛋白因子（转录因子）的协助，它们与RNA聚合酶Ⅱ形成转录起始复合物，共同参与转录起始的过程。 转录起始上游的DNA序列 顺式作用元件(cis-acting element) “cis-”有“分子内”的意思