酶促对映选择性水解乙酰氧基苯乙酸生产光学纯扁桃酸.pdf

酶促对映选择性水解乙酰氧基苯乙酸生产光学纯扁桃酸 鞠鑫，潘江，许建和* （华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物催化与加工研究室，上海 200237） 摘要：尝试了多种水解反应制备光学纯扁桃酸的方法，发现对映选择性水解消旋扁桃酸酯化 产物和酰化产物可以得到较高的转化率和高选择性。从广泛采集的200 份土样中利用富集培 养得到了100 多株具有水解乙酰氧基苯乙酸的菌落，其中有较高对映选择性水解活力的一株 细菌根据16s rDNA 测序鉴定为假单胞菌，命名为Pseudomonas sp. ECU1011 。对该菌的最适 温度和pH 等催化特性如进行了初步研究，得到了光学纯度 98.1%ee 的(S)-扁桃酸并对其底 物谱进行了拓展。 关键词：扁桃酸；对映选择性水解；乙酰氧基苯乙酸 Preparing mandelate by enzymatic enantioselective hydrolysis of acetoxy phenyl acetic acid JU Xin, PAN Jiang, XU Jianhe (State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China) Abstract: Microbial strains were screened and isolated from soil to find esterases which can hydrolyze the esterification product or the acylation product of mandelate. Enrichment culture was used to isolate more than 100 target strains from 200 soil samples from different parts of China. One of them which shows high eep and ideal conversion was identified as Pseudomonas sp. by 16S rDNA method and was named Pseudomonas sp. ECU1011. The reaction conditions were optimized including pH and temperature. Finally, optically pure mandelate (98.1%ee) was prepared and the substrate spectrum of the bacterium was studied preliminarily. Key words: mandelate; enatioselective hydrolysis; acetoxy phenyl acetic acid 引言 [1-3] 扁桃酸学名α-羟基苯乙酸，是重要的医药和化工中间体 。光学纯扁桃酸可以通过化 学法和生物法制得，在制药工业中用途广泛。(S)-扁桃酸可以合成治疗尿失禁的药物，(R)- 扁桃酸可以用于合成β-内酰胺阻断剂。光学纯的扁桃酸还是重要的手性拆分剂，有大量关 于其拆分更加昂贵的手性化合物的报道。 在目前所采用的生产光学纯扁桃酸的方法中，生物法具有选择性高、转化率好的特点。 通过氧化其中一种对映体来拆分消旋扁桃酸的方法能够达到很高的底物浓度和选择性，但是 其得率不能超过50%[4] 。通过腈水解酶对映选择性水解扁桃腈可以达到很高的转化率和选择 性[5] ，但是扁桃腈的生产和运输的安全性有所限制，产生的氨处理也存在问题。通过对映选 择性水解扁桃酸的酯化和酰化产物，可以同时获得光学纯的扁桃酸和光学纯的相反手性的 酯，是非常有前途的一种方法。 本实验室先后试验了不同方法探索生产光学纯扁桃酸，包括氧化拆分，腈水解酶等方法， 最近我们