【金版学案】高中生物 专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离课件 新人教版选修1.pptVIP

二、血红蛋白的提取和分离的实验操作 1．样品处理 (1)红细胞的洗涤：洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白。采用低速短时间离心，吸出上层透明的黄色血浆，再加入五倍体积的生理盐水，重复洗涤三次，直至上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。洗涤次数过少，无法去除血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，达不到分离的效果。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 * (2)血红蛋白的释放：红细胞在蒸馏水和甲苯的作用下破裂，释放出血红蛋白。 (3)分离血红蛋白溶液：将混合液进行离心后，会明显看到试管中的溶液的分层情况：第3层的红色透明液体是血红蛋白的水溶液。 (4)透析：目的是除去样品中的相对分子质量较小的杂质。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 * 2．凝胶色谱操作 (1)凝胶色谱柱的装填： ①装填前，凝胶用蒸馏水或者洗脱液充分溶胀。 ②凝胶装填要均匀，色谱柱内不能有气泡，一旦发现存在气泡，必须重装。 ③装填完后，立即用300 mL 20 mmol/L磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶，使凝胶装填紧密。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 * (2)样品的加入和洗脱： ①加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐，关闭出口。 ②按正确方法加样，不能破