酶工程第一章幻灯片.pptVIP

20世纪50年代，酶分子修饰和固定化技术发展。 20世纪60年代，模拟酶技术的发展。 20世纪70年代，酶的基因工程技术发展。 20世纪80年代，酶的非水相催化技术发展。 第二节 酶的催化特点及影响因素 一、酶的催化特点 * 氨基酸工艺学 第三章 谷氨酸生产菌的特征、育种及扩大培养 第一章 酶工程基础 酶工程 酶 工 程 王常高wcg71415@163.com 第一节 酶工程概述 第二节 酶的催化特点及影响因素 第三节 酶的活力测定 第四节 酶反应动力学 第一章 酶工程基础 第一节 酶工程概述 一、酶及酶工程的研究意义 酶是生物催化剂，其化学本质包括蛋白质和核酸两大类。 酶是生命活动的产物，又是生命活动不可缺少的成分。研究酶与生命活动、代谢调节、遗传疾病以及生长发育的关系，对于阐明生命现象的本质及其规律具有重要的意义。 酶的生产和应用的技术过程称为酶工程。酶工程是现代生物技术四大工程技术之一，同其他技术相互交叉，相互促进和发展。 酶作为一种生物催化剂，同无机催化剂相比，具有催化效率高、专一性强、反应条件温和等优点，使得酶能够在食品、轻工、医药、化工、能源、环保、科研等领域得到广泛的应用。 酶工程技术的研究对于改善人类生活，促进社会发展具有重要的意义。 （一）酶的原始利用 二、酶的研究简史 最早4000年前的夏禹时代——酿酒技术 公元前10世纪——豆酱的制作 2700年前的周代——利用麦芽制麦芽糖（饴糖） 2500年前——利用酒曲治疗消化疾病 春秋战国时期——漆酶制作油漆 中国 最早6000年前——古巴比伦人利用麦芽酿酒 古埃及时代——酵母发酵面包 西方 （二）酶的发现和发展 1833 Payen和Persoz从大麦芽中分离出淀粉酶。 1897 巴克纳兄弟发现酵母细胞抽提物可发酵酒精。 1894 费歇尔建立钥匙-锁理论。 1961 Monod提出“变构模型”。 1913 米彻利斯和曼吞建立米氏方程。 1926 萨姆纳得到尿酶结晶，证实酶的蛋白质本质。 1982 Cech和Altman分别发现了核酶。 1995 Cuenoud发现部分DNA分子也有催化功能。 （三）酶工程的发展概况 19世纪末期之前，酶的生产—提取法。 19世纪末期，酶的大规模应用—酒曲的固体发酵。 20世纪40年代，液体深层通风发酵技术的开发。 1960年，雅各布和莫诺德提出“操纵子学说”。 分离技术发展，使酶的应用从粗酶到高纯度酶。 （1）极高的催化效率 （2）高度的专一性 （3）活性的可调节性 （4）活性的不稳定性 绝对专一性，相对专一性，立体异构专一性 二、影响酶催化作用的因素 1. 底物浓度的影响 2. 产物浓度的影响 3. 酶浓度的影响 υ=κ· [ E ] 4. 温度的影响 υ S Vmax Km 1/2Vmax 5. pH的影响 υ T (pH) 6. 抑制剂的影响 （1）不可逆的抑制作用 （2）可逆的抑制作用 竞争性可逆抑制、非竞争性可逆抑制、反竞争性可逆抑制 7. 激活剂的影响 （1）无机离子激活剂 Cl-,Br-,I-,Zn2+,Mg2+,Ca2+,Na+ （2）小分子有机化合物 抗坏血酸，半胱氨酸，谷胱甘肽 （3）生物大分子激活剂 激酶 第三节 酶的活力测定 酶活力，又称酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力，酶活力可用酶催化的某一化学反应的速率来表示。反应速率越大，酶活力越高。因此，酶活力的测定实际上就是通过测定酶所催化的化学反应的速率来测定的。化学反应的速率可用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。 一、酶活力单位 酶活力单位是表示酶量多少的单位。不同的酶，测定方法不同，反应条件不同，对活力单位的定义也不相同。 国际酶活力单位（IU）: 在特定条件下，每分钟催化1umol的底物转化为产物的酶量。 酶活力单位—催量（kat）: 在最适条件下，每秒钟催化1mol的底物转化为产物的酶量。 1kat = 1mol/s = 60mol/min = 6×107IU 二、酶的比活力 在特定条件下，单位质量的酶（蛋白或RNA )所具有的酶活力单位数称为酶的比活力。 酶的比活力 = 酶活力（U）/mg（蛋白或RNA ) 酶的比活力可用来表示酶制剂的纯度或活力的高低。 三、酶的转换数和催化周期 转换数（Kcat）: 单位时间内，酶分子中每个活性中心或每个酶分子所能转化的底物分子数。 催化周期 （T） : 指酶进行一次催化所需的时间。 T