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转基因技术在改良大白菜性能方面的应用 　　【摘 要】大白菜营养丰富，是我国北方冬季的主要供应蔬菜，也是我国居民消耗量较大的蔬菜。但大白菜的生长易受外界环境影响，导致产量下降，进而造成价格波动。通过转基因技术改良大白菜性能，对于稳定产量，确保物价正常有着卓越贡献。 　　【关键词】大白菜；转基因技术；稳定产量 　　一、转基因技术简介 　　转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的DNA片段。DNA片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再从重组体中进行数代的人工选育，从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种。 　　二、白菜类蔬菜离体培养的影响因素 　　植物组织培养是一种进行遗传改良的有效手段，利用农杆菌介导的遗传转化将目的基因转入蔬菜当中，可以改良其品质、抗病性与抗逆性等性状。而构建高效的再生培养体系是对蔬菜进行遗传转化的必要前提。大白菜是芸薹属蔬菜中离体再生比较困难的物种之一，影响其离体再生的因素主要有：植物的基因型、外植体类型、外植体的生理状态、接种方式、分化培养基的配方、生根培养基的配方等。 　　（一）基因型 　　早在1982年，Dietert就提出基因型在蔬菜再生培养中起决定性作用。Murata进一步指出，C基因组可能负责调控芽的生成，芸薹属中的花椰菜和甘蓝等由于具有C基因组而使较容易再生培养，而缺少C基因组的白菜类蔬菜（AA基因组）却很难再生。 　　（二）外植体 　　1.外植体的苗龄也是一个影响不定芽形成的重要因素。 　　2.外植体接种方式 　　朱丽华等对大白菜下胚轴的3种接种方式进行了对比，研究发现，下胚轴形态学下端竖直正插比反插和平放的外植体更利于不定芽形成，而且发现，再生芽总是出现在下胚轴形态学下端。这可能是由于接种方式影响了外植体与生长环境的接触形态，正插的叶柄切口位于形态学下端，可以充分接触与吸收培养基中的激素等利于再生芽形成的养分。 　　（三）AgNO3 　　目前，AgNO3在组织培养中已得到了广泛运用。Akasaka等许多研究者认为，乙烯会抑制不定芽的再生和形态建成，AgN03可以通过竞争性结合位于细胞间膜的乙烯受体，干扰乙烯信号传递途径，降低乙烯的活性，从而促进白菜等A基因组蔬菜的器官发生和体细胞胚胎发生。杜虹等在再生培养基中添加2mg/L的AgNO3，不定芽的再生频率会从无添加AgNO3的28.26%提高到71.7%。 　　（四）植物激素组成 　　在白菜类蔬菜再生培养的研究中，6-BA和NAA组合最为常用。张鹏等发现，6-BA和NAA结合使用的效果优于单独使用，组合使用二者会提高3―4倍的不定芽再生率，也会加倍提升丛生芽数。此外，徐华松认为TDZ对不定芽的再生、体细胞的胚胎发生具有重要作用，樊明琴等认为TDZ比6-BA有更佳的不定芽诱导效果，但是过高浓度的TDZ会使再生芽畸形，呈丛生状，不易分离，导致芽成苗困难。 　　三、白菜类蔬菜转基因研究现状 　　大白菜是我国最主要的蔬菜作物之一，其营养丰富，富含各种维生素、胡萝卜素、植物纤维以及蛋白质等，还具有很高的药用价值，如具有清热解毒等功效。近年来人们对大白菜的需求量越来越大，尤其是品质优良的大白菜己供不应求，这就促使我们需要通过各种手段来获得优良的大白菜。其中利用基因工程手段来获得育种材料是蔬菜育种的新趋势。目前成功转入大白菜的外源基因主要有：雄性不育基因、抗虫基因、抗病基因等。 　　（一）抗虫基因 　　白菜类蔬菜的害虫是鳞翅目的小菜蛾和菜青虫。常用的化学药剂喷施法很容易使害虫获得农药耐受性，为抗虫工作带来不便，近年来对抗虫基因的克隆与转化使抗虫育种有了很大进展。目前报道的抗虫基因主要有两种：源于植物中的蛋白酶抑制因子（PI）基因以及源于苏云金芽孢杆菌的毒素（Bt）基因。其中，外源毒素基因Bt的编码产物对鳞翅目有较强的毒杀能力，PI基因编码产物的抗性范围广，对鞘翅目、鳞翅目与直翅目等昆虫都有毒杀作用，但杀伤力相对较弱。目前对Bt基因的研究最广泛。 　　（二）抗病基因 　　白菜生长过程中极易受到病毒的侵害，由于病毒的组成与胞内许多生物大分子的结构相似，因此很难运用化学方法进行防治。杨瑞环等将病毒外壳蛋白（CP）编码基因转入受体细胞中表达，通过该蛋白在植物细胞中的积累，可以抑制侵染病毒的复制，从而减轻感染症状或延缓病毒发生时间。现己证明芜菁花叶病毒（TuMV）是白菜病毒病的主要病原，该病毒可造成大白菜无法结球，导致大白菜的产量和品质严重受损。 　　（三）抗除草剂基因 　　改变植物对除草剂的耐受方式主要有两种：一是钝化植物对除草剂的敏感性， 二是转入外源基