miRNA 在哮喘小鼠肺组织及肥大细胞中的表达差异.pdfVIP

·免疫性疾病· DOI 0 3760 / c a j ssn 2095- 428X 20 5 2 0 基金项目：国家自然科学基金（青年科学基金项目）（8 2000 2）；南京市 医学科技发展资金资助（南京市卫生青年人才培养工程、第三层次） 作者单位：2 0008 南京医科大学附属南京儿童医院呼吸科［莫珍珍 （现在安徽马鞍山市十七冶医院儿科）、周瑶、徐红、张佳敏、邓欢、刘峰、 赵德育］ 通信作者：赵德育，E a l zhaodeyu98@ 26 co miRNA在哮喘小鼠肺组织及肥大细胞中的 表达差异 莫珍珍 周瑶 徐红 张佳敏 邓欢 刘峰 赵德育 【摘要】 目的 研究 miRNA在卵清蛋白（OVA）诱导的支气管哮喘（简称哮喘）小鼠模型中及炎性因子刺 激肥大细胞 P815 后的表达差异，以进一步了解哮喘的发病机制，为哮喘的防治提供新的靶点。方法 采用 OVA诱导的哮喘小鼠模型，通过检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞数及组织病理验证模型的成功建立， 应用实时荧光定量 PCR法检测哮喘小鼠模型肺组织中 miRNA与正常对照组的表达差异。采用炎性因子肿瘤 坏死因子 α （TNF α ）、白细胞介素 12（ IL 12）刺激肥大细胞，检测 miRNA 与正常对照组的表达差异。结果 OVA诱导的哮喘小鼠模型组 BALF中细胞总数［（12. 8 ± 2. 2）x 107 / L］较正常对照组［（5. 6 ± 2. 5）x 107 / L］显 著升高（ t ＝ 4. 760，P ﹤ 0. 05）；嗜酸性粒细胞数［（6. 6 ± 1. 9）x 107 / L］较正常对照组［（0. 8 ± 0. 8）x 107 / L］显著 升高（ t ＝ 8. 068，P ﹤ 0. 05）。组织病理显示哮喘模型组小鼠呼吸道炎性细胞浸润程度明显高于正常对照组，模 型建立成功。在哮喘模型组小鼠的肺组织中，miRNA 155 的表达约为正常对照组的 5 倍（ P ﹤ 0. 05）， miRNA 192的表达相对于正常对照组差异无统计学意义。TNF α 刺激肥大细胞 P815 后，miRNA 192 的表达约 为正常对照组的 1. 9 倍（P ﹤ 0. 05）。IL 12 刺激肥大细胞 P815 后，miRNA 192 的表达约为正常对照组的 1. 7 倍 （P ﹤ 0. 05）。结论 miRNA在 OVA诱导的哮喘小鼠模型及炎性因子刺激肥大细胞后存在差异表达，而这些差 异表达的 miRNA可能通过调节肥大细胞的功能参与哮喘的发病。 【关键词】 支气管哮喘；miRNA；肥大细胞；炎性因子 The expression differences of miRNA in lung tissue and mast cells of asthmatic mice Mo Zhenzhen，Zhou Yao， Xu Hong，Zhang Jiamin，Deng Huan，Liu Feng，Zhao Deyu. Department of Respiratory，Nanjing Children＇s Hospital Affi- liated to Nanjing Medical University，Nanjing 210008，China Corresponding author：Zhao Deyu，Email：zhaodeyu98@ 126. com 【Abstract】 Objective To study miRNA expression differences in ovalbumin（OVA） induced murine asthma models of mice and mast cells stimulated by inflammatory cytokines stimulation，and to better understand asthma deve lopment so as to provide potential target for its prevention and treatment. Methods OVA induced murine asthma models were validated by detecting cells in bronchoalveolar lavage fluid（BALF）and histopathology. And miRNA ex pression differences in the lung tissues between the model group and the normal control group were detected by real time polymerose