PCR原理与操作讲义.pptVIP

* 翻译：即蛋白质的生物合成，是将核酸RNA中密码子破译的方式解读为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序 。翻译过程从5′-AUG开始，按mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链，直至终止密码出现。 （三）翻译：蛋白质的生物合成 * * 1、定义：聚合酶链反应（PCR）是在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。可用于基因分离克隆，序列分析，基因表达调控，基因多态性研究等许多方面。 三、PCR原理 PCR是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 * 1953年，Watson和Crick提出DNA双螺旋结构及半保留复制模型。 1958年，Meselson和Stahl用实验证实DNA半保留复制模型。 70年代以来，人们采用两种思路去尝试建立基因的无性繁殖体系，一是基因克隆技术，二是体外扩增技术。 1971年，Khorana（美国，1968年诺贝尔医学奖得主）：“经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。” 核酸体外扩增最早设想被遗忘原因:（1）很难进行测序和合成寡核苷酸引物；（2）1970年Smith等发现了II型限制性内切酶，体外克隆基因已成为可能。 2、