第九章紫外-可見分光光度法.ppt

4-3-4 光度测量条件的选择 1.选择适当的入射光波长 一般应该选择λmax为入射光波长。 如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 Fe3＋与SCN－形成血红色配合物，在490nm处有强吸收峰。其实质是发生了如下反应：[Fe3＋ SCN－ ] ＋hν= [Fe SCN ]2＋ 2.选择合适的参比溶液 为什么需要使用参比溶液？ 参比溶液用来调节仪器工作零点。通过选择适当的参比溶液，可消除某些干扰因素。 目的：测得的的吸光度真正反映待测物的浓度。 参比溶液的选择一般遵循以下原则： ⑴ 当试液、显色剂和条件试剂（如pH缓冲溶液、掩蔽剂等）均无色时，用纯溶剂（水)作参比溶液； （2）若显色剂、条件试剂无色，而试液中其它共存离子有色，则用不加显色剂和条件试剂的试液作参比溶液，可消除共存离子的颜色干扰。 （3） 若显色剂、条件试剂均有色，可取一份试液加入掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，再加入显色剂、条件试剂，以此混合液作参比溶液，可消除条件试剂、过量显色剂的颜色干扰。 3.控制适宜的吸光度（读数范围） 对于一个给定的分光光度计，透光率读数误差ΔT 为常数，约0.01～0.002。但是，测定结果的精度用Δc/c 表示。 －lgT=εbc 浓度测量值的相对误差（Δc/c）不仅与仪器的透光度误差ΔT 有关，而且与其透光度读数T 的值也有关。 是否存在一个T的最佳读数范围，使得Δc/c最小？ 最佳读数范围与最佳值 设：ΔT =1%，则可绘出溶液浓度相对误差Δc/c与其透光度T 的关系曲线。如图所示： 当：T 在20%～65%之间时，浓度相对误差最小，最佳读数范围。 可求出浓度相对误差最小时的透光度Tmin为： Tmin＝36.8%, Amin＝0.4343 用仪器测定时应尽量使溶液透光度值在T %=20～65% ， 吸光度 A =0.70～0.20，测量的相对误差1%。 怎样控制吸光度读数在0.2～0.7范围内？ 1. 计算并控制试样的称取量。 2. 改变吸收池的厚度。 3. 选择合适的参比溶液。 目 录 4-1 基本原理 4-2 紫外-可见分光光度计 4-3 显色反应与光度测量条件的选择 4-4 定性分析与结构解析 4-4-1 定性方法 4-4-2 有机化合物结构解析 4-5 定量分析 λmax ?max：化合物特性参数，可作为定性依据； ?max ， ?max都相同，可能是同一个化合物； 标准谱图库：46000种化合物紫外光谱的标准谱图 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet? 吸收光谱曲线的形状、吸收峰的数目、 4-4-1 定性方法 结构鉴定的辅助工具 4-4-2 有机化合物结构辅助解析 ?可获得的结构信息 （1）200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2） 270-350 nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮 n→π* 跃迁产生的R 带。 （3） 250-300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200-2000），芳环的特征 吸收（具有精细结构的B带）。 （4） 200-250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有一个共轭体系（K）带。共轭二烯：K带（?230 nm）；????不饱和醛酮：K带?230 nm ，R带?310-330 nm 260nm,300 nm,330 nm有强吸收峰，3,4,5个双键的共轭体系。 目 录 4-1 基本原理 4-2 紫外-可见分光光度计 4-3 显色与测量条件的选择 4-4 定性分析 4-5 定量分析 4-5-1 普通分光光度法 4-5-2 示差分光光度法 4-5-3 双波长分光光度法 4-5-1 普通分光光度法 1.单组分的测定 通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 2.多组分的同时测定 ⑴ 若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。 ⑵ 若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。 Aλ1= εaλ1bca ＋ εbλ1bcb Aλ2= εaλ2bca ＋ εbλ2bcb 依据：A =εb c 4-5-2 示差分光光度法（示差法） 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需采用示差法。即提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。