细菌单染色法及口腔微生物的观察.pptVIP

细菌单染色法及口腔微生物的观察 ━━基础生物学实验 一、实验目的 1 学习无菌操作，掌握 细菌的涂片和 单染色技术 . 2 了解口腔中的微生物及其观察方法 二、实验原理 (1)用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等）使其着色。酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷的物质结合。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色。中性染料是前两者的结合物又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等。染色可以分为单染（简单染色）和复染（革兰氏染色）。简单染色法是只用一种染料使细菌着色以显示其形态，简单染色不能辨别细菌细胞的构造。 三、实验仪器、材料与试剂  生物显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、吸水纸、无菌芽莶，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、大肠杆菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌S. aureus的斜面菌种，吕氏美蓝染色液、石炭酸复红染色液、黑色素液或碳素墨水、香柏油、二甲苯、无菌水 四、方法与步骤 (一)观察枯草芽孢杆菌活菌常用压滴