醇制半夏的工艺研究和优化实验设计.docxVIP

醇制半夏减毒及其优化实验设计【摘要】：半夏为临床常用药物，但因其有毒，所以必须进行炮制之后方可安全使用。本文详细介绍了半夏经过醇制减毒的新方法，并对炮制方法及炮制过程中所会影响到减毒效果的实验因素利用正交设计进行优化。【关键字】：半夏 醇制 正交设计 工艺一、研究背景以及原因：半夏为天南星科植物半夏的干燥块莲,为中医临床上常用中药,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痛散结之功效。生半夏有毒,辛辣、麻舌而刺喉,具有“戟人咽”的毒性,临床应用一般需炮制后入药。传统的炮制方法主要有两点弊端：1、半夏的炮制品清半夏、姜半夏的炮制工艺中均需加入白矾炮制减毒,但是由于白矾制后的饮片中铝残留较高,长期接触或摄入铝离子易诱发老年性痴呆等疾病,故《中国药典》2010版将白石凡残留量作为清半夏及姜半夏检查项之一。2、由于半夏炮制工艺包含长时间水浸泡或水浸泡后煎煮过程,有效成分易于流失。且由于半夏含有较多的淀粉、多糖类成分,在夏天高温条件下,长时间浸泡易发生霉变及腐败发臭。因此需要找一种新的方法来对半夏进行炮制处理。半夏刺激性毒性的物质基础是主要由草酸钙、蛋白组分形成的具有特殊晶体结构的毒针晶复合物,其致炎机制在于毒针晶中的凝集素蛋白随毒针晶刺入机体后诱导中性粒细胞迁移而导致强烈的炎症刺激,即为机械刺激与化学刺激的双重作用。文献研究发现， 从宋代到清代， 半夏有酒姜制 热酒烫后姜汁浸、 酒浸后麸炒的炮制方法 酒的主要成分是乙醇， 前期大量实验结果证实了半夏的刺激性毒性的物质基础是主要由草酸钙、蛋白形成的具有特殊晶体结构的毒针晶，而乙醇浸润或采用长时间加热的方法均可降低毒针晶的刺激性， 故本实验设计对半夏醇制进行研究和工艺的优化。二、研究目的：本实验设计想通过高浓度乙醇润制半夏， 探索半夏减毒存效新方法， 优选半夏醇制的最佳工艺，从减毒和存效两方面进一步考察半夏醇制工艺的合理性，为半夏醇制减毒存效新技术及工艺研究奠定基础以及为天南星科有毒中药减毒存效新技术及工艺研究提供借鉴。三、实验设计（一）传统炮制方法与醇制法对半夏刺激性的影响一、材料 ：仪器：电子天平、数显恒温水浴锅、fw80-I高速万能粉碎机、101A-1B型电热鼓风干燥箱。药材：半夏 （天南星科半夏属三叶半夏的干燥块茎） 试剂：95%乙醇、生理盐水 (水为重蒸水， 其他试剂均为分析纯)动物：大耳白兔,雌雄不拘。二、方法：1、样品炮制：烘制半夏:取生半夏50g,分别在不同温度(20℃、30℃、40℃、50℃, 60℃)温度下烘3天,得各温度烘制半夏;水制半夏:分别取生半夏50 g,加0.5倍量水分别在不同温度(20℃、30℃、40℃、50℃、60°C)条件下润制3天,干燥,得不同温度条件下水润制的半夏;醇制半夏:分别取生半夏50 g,加0.5倍量75%乙醇溶液分别在不同温度(20℃、30℃、40℃、50℃、60℃)条件下润制3天,干燥,得不同温度条件下乙醇润制的半夏。润制方法:在密闭容器中,以定量的水或乙醇溶液浸润半夏,经常翻动,使溶液缓缓渗入内部,以“水浸药透”为准。2、实验方法：家兔随机分组,固定于兔笼内,每组样品用兔眼6只,试验时撩起上下眼睑,使成杯状,将各样品混悬液分别滴加到兔左右眼中,每只眼给样50 ^Lo给药后,轻轻使上下眼险被动闭合10 S,使样品混悬液和眼充分接触,2 min后立即用50 mL生理盐水冲洗眼睛至肉眼观察家兔眼中无任何异物,于1.5 h后观察兔眼情况,并拍照记录家兔眼的刺激反应。以生理盐水做空白。观察兔眼的结膜刺激程度，按照评分标准记录并统计。并且拍照进行记录。表一：家兔结膜刺激程度评分标准得分充血水肿分泌物0血管正常无水肿无分泌物1血管充血呈鲜红色轻微水肿少量分泌物2血管充血呈深红色,血管不易分辨明显水肿， 伴部分眼睑外翻分泌物使眼睑和睫毛潮湿或黏着3弥漫性充血呈紫红色水肿至眼睑近半闭合分泌物使整个眼区潮湿或黏着4水肿至眼睑超过半闭合三、结果预测：烘制半夏即使在较高温度下,刺激性未发生显著变化。经水或75%乙醇溶液润制后的半夏刺激性均有下降,且随温度升高,下降趋势明显。研究发现在相同条件下,乙醇润制半夏刺激性显著小于水润制的半夏,表明乙醇相较于水更能快速降低半夏毒性。四、讨论：生半夏的毒性主要表现为对點膜(包括胃、肠道、眼及咽喉)的强烈刺激作用,生品混悬液能使家鸽呕吐,可使家兔眼结膜强烈水肿,可致小鼠喉部明显水肿和充血。可见见半夏的刺激性作用是一种显著的炎症刺激反应。半夏的毒性成分及毒性机理研究证实半夏中的刺激性毒性成分为其所含有的具特殊品休结构的毒针晶复合物,毒针晶可致家兔眼结膜显著水肿、大鼠足祉肿胀,也具有显著的炎症刺激性作用。经过实验研究推测可知经75%乙醇润制后的半夏比单纯水润制,其刺激性毒性下降程度更趋显著。乙醇等极性溶剂有使蛋白类成分变性的作用,故可