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临床检验操作规程
第一节 临床血液学检验
血常规检查
【 标 本 】
抗凝静脉血(有些仪器也可用末梢血)。
【 方 法 】
血液细胞自动分析仪测定法。
【 试 剂 】
血液细胞自动分析仪配套试剂。
【 操 作 】
详见自己实验室血液细胞自动分析仪使用手册。
【 附 注 】
1. 血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法,详见有关资料。
2. 半自动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。其优点为:
(1)静脉血能正确地反映病人实际情况,重复性好;
(2)利于延长仪器的使用寿命;
(3)解决了采血盘的交叉感染问题等。
3. 血细胞计数应用EDTA·K2:为抗凝剂(EDTA·K2·2 H2O 1.5~2.2mg可抗凝1ml血)。
4. 贮血容器应选用有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h;如需制作血涂片应在2h内完成。
5. 测定前必须将EDTA·K2抗凝血充分混匀。
6. 血细胞分析仪测定最适温度为18~22℃,低于15℃或高于30℃,均可使细胞体积发生改变,影响各参数的结果。
7. 血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段,当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显升高或降低;白细胞分类出现异常结果(中间细胞群百分率≥8.0%);红细胞、白细胞和血小板的任何一个直方图出现异常图形等情况,须用显微镜检查及分类。
嗜酸性粒细胞直接计数
【 标 本 】
末梢血或抗凝静脉血。
【 方 法 】
直接计数法。
【 试 剂 】
1. Hinkelmann液;
2. 乙醇- 伊红稀释液;
3. 伊红- 丙酮稀释液。
【 操 作 】
1.小试管中加稀释液0.38ml。
2.常法取末梢血20ul,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充池。
3.静置3~5min ,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。总数×20×106=嗜酸性粒细胞/L。
【 附 注 】
1. 血液稀释后应于1 h 内计数完毕。
2. 充池前要充分混匀,但又不宜用力过猛。
3. 住院病人采集标本时间力求统一,以免受日间生理变化的影响。
红细胞沉降率测定
【 标 本 】
抗凝静脉血。
【 方 法 】
魏氏法。
【 试 剂 】
109mmol/L枸橼酸钠溶液。
【 操 作 】
1. 3mm×100mm试管1支,在2ml容量处刻上记号,加抗凝剂0.4ml。
2. 静脉采血后,取下针头,加血至刻度,旋转混合。
3. 用血沉管(300mm×2.5mm)吸取上述混匀血液至 0 刻度处,拭去管外附着的血液,将管垂直立在血沉架上。
4. 记时,室温中静置1h,观察血浆高度,以红细胞下沉的毫米数报告之。
【 附 注 】
1. 红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量与质,血浆中脂类的量和质,红细胞的大小与数量,是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直,室温高低等因素都有关系。
2. 标本采集时应空腹。
3. 血液和抗凝剂的比例要准确。
4. 血沉管内径要标准(2.5mm),放置要垂直。
5. 做血沉的标本要在采集后3h 内测定,并充分混匀。
6. 室温过低、过高和贫血时,对结果有影响。为此,血沉应尽量放在18~25℃室温下测定。室温过高时血沉加快,可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢,无法校正。
网织红细胞计数
【 标 本 】
末梢血或抗凝静脉血。
【 方 法 】
百分计数法。
【 试 剂 】
10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液或10g/L煌焦油蓝ACD溶液。
【 操 作 】
1. 于小试管中滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液或煌焦油蓝ACD溶液。
2. 加入末梢血或静脉血2 滴于上述试管中,混匀。
3. 静置15~20min 后,取用1 滴制成薄片。
4. 油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数,以百分率或绝对值报告。
【 附 注 】
1. 活体染色时间不能过短,室温低时,放37℃温箱。
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