发酵工艺过控制.doc

第七章 发酵工艺过程控制 教学目的：1、熟悉发酵过程的主要控制参数； 2、温度的控制 工业生产上，所用的大发酵罐在发酵过程中一般不需要加热，因发酵中释放了大量的发酵热，需要冷却的情况较多。 利用自动控制或手动调整的阀门，将冷却水通入发酵罐的夹层或蛇行管中，通过热交换来降温，保持恒温发酵。 如果气温较高（特别是我国南方的夏季气温），冷却水的温度又高，致使冷却效果很差，达不到预定的温度，就可采用冷冻盐水进行循环式降温，以迅速降到最适温度。因此大工厂需要建立冷冻站，提高冷却能力，以保证在正常温度下进行发酵。 第三节 pH值对发酵的影响及其控制 一、pH值对发酵的影响 1、影响酶的活性，当pH值抑制菌体中某些酶的活性时，会阻碍菌体的新陈代谢； 2、影响微生物细胞膜所带电荷的状态，改变细胞膜的通透性，影响微生物对营养物的吸收和代谢产物的排泄； 3、影响培养基中某些组分的解离，进而微生物对这些成分的吸收； 4、pH值不同，往往引起菌体代谢过程的不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。 二、发酵过程pH值的变化 在发酵过程中，随着菌种对培养基种碳、氮源的利用，随着有机酸和氨基酸的积累，会使pH值产生一定的变化。 1、生长阶段：菌体产生蛋白酶水解培养基中的蛋白质，生成铵离子，使pH上升至碱性；随着菌体量增多，铵离子的消耗也增多，另外糖利用过程中有机酸的积累使pH值下降。 2、生产阶段：这个阶段pH值趋于稳定。 3、自溶阶段：随着养分的耗尽，菌体蛋白酶的活跃，培养液中氨基氮增加，致使pH又上升，此时菌体趋于自溶而代谢活动终止。 由此可见，在适合于菌生长及合成产物的环境条件下，菌体本身具有一定的调节pH的能力，但是当外界条件变化过于剧烈，菌体就失去了调节能力，培养液的pH就会波动。 三、引起发酵液pH值异常波动的因素 pH值的变化决定于所用的菌种、培养基的成分和培养条件。 1、pH下降： （1）培养基中碳、氮比例不当。碳源过多，特别是葡萄糖过量，或者中间补糖过多加上溶氧不足，致使有机酸大量积累而pH下降； （2）消泡剂加得过多； （30生理酸性物质的存在，铵被利用，pH下降。 2、pH上升： （1）培养基中碳、氮比例不当。氮源过多，氨基氮释放，使pH上升； （2）生理碱性物质存在； （3）中间补料氨水活尿素等碱性物质加入过多。 四、发酵pH值的确定和控制 1、发酵pH值的确定 微生物发酵的最适pH值范围一般是在5～8之间。 最适pH值是根据实验结果来确定的。 将发酵培养基调节成不同的出发pH值，进行发酵，在发酵过程中，定时测定和调节pH值，以分别维持出发pH值，或者利用缓冲液来配制培养基来维持。 到时观察菌体的生长情况，以菌体生长达到最高值的pH值为菌体生长的合适pH值。 用同样的方法，可测得产物合成的合适pH值。 同一产品的合适pH值，与所用的菌种、培养基组成和培养条件有关。 在确定合适发酵pH值时，不定期要考虑培养温度的影响，若温度提供或降低，合适pH值也可能发生变动。 2、pH值的控制 （1）首先考虑和试验发酵培养基的基础配方，使它们有个适当的配比，使发酵过程中的pH值变化在合适的范围内。 （2）在发酵过程中直接补加酸或碱和补料的方式来控制；补充生理酸性物质（如(NH4)2SO4）和生理碱性物质（如NaNO3）来控制。 第四节 溶解氧对发酵的影响及其控制 一、溶解氧对发酵的影响 在发酵过程中，影响耗氧的因素有以下几方面： 1、培养基的成分和浓度 2、菌龄 3、发酵条件 二、溶解氧浓度的控制 在供氧方面，主要是设法提高氧传递的推动力和液相体积氧传递系数。 1、调节搅拌转速或通气速率来控制供氧； 2、控制补料速度来控制基质的浓度，从而达到最适的菌体浓度，保证产物的比生长速率维持在最大值，又不会使需氧大于供氧。 3、采用调节温度（降低培养温度可提高溶氧浓度）、液化培养基、中间补水、添加表面活性剂等工艺措施，来改善溶氧水平。 第五节 菌体浓度和基质对发酵的影响及其控制 一、菌体浓度对发酵的影响及控制 菌体（细胞）浓度【简称菌浓】是指单位体积培养液中菌体的含量。 菌浓的大小，在一定条件下，不仅反映菌体细胞的多少，而且反映菌体细胞生理特性不完全相同的分化阶段。 依靠调节培养基的浓度来控制菌浓。 首先确定基础培养基配方中有个适当的配比，避免产生过浓（或过稀）的菌体量。 然后通过中间补料来控制，如当菌体生长缓慢、菌浓太稀时，则可补加一部分磷酸盐，促进生长，提高菌浓；但补加过多，则会使菌体过分生长，超过临界浓度，对产物合成产生抑制作用。 利用菌体代谢产生的CO2量来控制生产过程的补糖量，以控制菌体的生长和浓度。 二、基质对发酵的影响及控制 基质即培养微生物的营养物质。 1、碳源对发酵的影响及控制 （1）迅速利用的碳源：葡萄