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研究生课程论文 课 程: 微生物检测技术 题 目 LAMP技术及其在微生物检测中的应用 姓 名: 王 飞 学 院: 生命科学学院 专 业: 微生物 学 号: 2011216016 20 11 年 12 月 30 日 LAMP技术及其在微生物检测中的应用 摘要：环介导等温扩增(1oop-mediated isothermal amplification，LAMP)技术是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温扩增，且由于LAMP反应中产生大量的副产物一白色焦磷酸镁沉淀，扩增产物可不经过电泳，通过肉眼观察或浊度计即可判定结果。因此LAMP是一种不需要热循环仪、肉眼即可判定结果的高度特异和敏感的DNA扩增方法。近年LAMP技术在病原微生物检测及食品微生物检测上已有广泛应用，本文就这两方面的研究进展作一综述。Application of LAMP in detection of microorganism Abstract: LAMP (loop-mediated isothermal amplification) method, which develops in recent years, is a sensitivity, special and convenience nucleic acid amplification technique. To compare with the traditional PCR, LAMP, which needn’t hot circle, is constant temperature amplification. Because LAMP can produce a mount of coproduce, magnesium pyrophosphate, which is a white precipitation, the result can be estimated by eyes or nephelometer without electrophoresis. In recent years, the application of LAMP in detection of disease pathogen and microorganism in food had been wide studied. These articles summarize the studies in these two aspects. Key words: LAMP; loop-mediated isothermal amplification; nucleic acid amplification 1.引言 核酸体外扩增技术是分子生物学领域最重要的研究手段之一，以检测核酸为基础的分子诊断技术已广泛应用于临床医学和微生物检测等领域。目前，核酸体外扩增技术主要包括常规PCR扩增和等温扩增两大类。常规PCR包括单一PCR[1]、复合PCR[2]、套式PCR、竞争性PCR[3]和实时荧光定量PCR[4-8]，等温扩增包括核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)DNA 扩增(rolling circle DNA amplification，RCA)(exponential amplification reaction，EXPAR)(ligase chain reaction，LCR)(strand displacement amplification，SDA)(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)PCR扩增由于快速、灵敏度和特异性高等优点广泛用于分子诊断领域，但由于常规PCR扩增需要配套的控温精密的仪器和复杂的实验程序，大大提高了检测成本。等温扩增技术是近年来发展迅速的一类核酸体外扩增检测技术，其区别于常规PCR扩增技术的关键在于扩增反应的温度不同，无需控温精密的实验仪器和复杂的实验程序。上述几种等温核酸扩增技术中，LAMP技术由于具有快速、高效、灵敏度高、特异性高和可定量分析等优点已经广泛用于临床和微生物分子诊断领域。本文就LA