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果蝇等生物有关性状的遗传学分析 实验性质:设计性实验 实验时间:4月中旬~5月中旬 实验分组:3~4人一组 有关要求:4月16日前提交实验设计方案,5月20日前提交实验报告。 现有条件: 材料:八种果蝇类型:野生型(+)、黑檀体(e)、残翅(vg)、白眼(w)、黑体(b)、短(小)翅(m)、白眼小翅(wm)、小翅黑体(mb) 药品用具:相关试剂、用具 遗传学实验室 实验目的及要求 1、实验目的: 掌握有代表性实验材料的选取方法; 掌握果蝇的性状遗传分析方法 了解由性染色体上基因所控制的性状分离规律; 要求能独立查阅相关资料, 掌握实验结果的统计分析方法, 理解孟德尔自由组合定律的基本内容; 初步掌握设计实验的方法步骤。 2、实验要求: 3~4人一组,每组任意选择2种类型的突变型,分析这两种突变型之间的遗传关系。要求每组做正反交,并进行预假设和适合度检验。 实验前要写好设计方案,涉及原理、实验流程、预期结果、参考文献等。 实验过程中: 1、处女蝇的选择要准确。 2、麻醉深度适当; 3、若F1性状混杂,暂停; 4、培养基不够用,自行配制,注意配方和数量; 5、安排人员值班,每人2d,早、晚各1h。钥匙不得转手。同时督促各组做好开放实验登记和清洁卫生。 果蝇的雌雄鉴别 三、果蝇的麻醉 麻醉方法: 取一麻醉瓶,瓶口与培养瓶大小相仿, 取一棉花塞,在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚,将果蝇转入麻醉瓶内,翻转麻醉瓶使瓶口朝上,迅速将滴有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口,约1min左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。 再麻醉 观察或计数过程中,果蝇可能苏醒,可准备一玻璃培养皿,内以胶带贴一小块棉球,滴入适量乙醚,培养皿口朝下置于一旁备用,如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下,盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。 果蝇转入麻醉瓶方法 死亡果蝇的标志 四、果蝇的突变型 果蝇具有丰富的外表型态差异,包括眼色、眼形、翅形、翅脉横隔、刚毛形状与数目、体色等。 翅脉横隔 体色 翅形 眼色 刚毛形态 果蝇常见突变型 果蝇突变性状及基因 五、果蝇的饲养 果蝇的饲养 1、 培养瓶、塞子灭菌 2、培养基的配制 (1)果蝇培养基成份(100ml) 果蝇的转移 转移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶: 取一新培 养瓶,略为松动棉塞,放置于右手侧,取欲转 移果蝇培养瓶于左手侧,以左手握住瓶颈,两 指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落 于培养基表面,左手拔起棉塞以两指夹住,右 手两指夹住棉塞新培养瓶棉塞,并将新培养瓶 倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接 处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌 心轻拍旧培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶 内,迅速盖上各瓶棉塞。 转移果蝇时,为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,可将培养瓶横放,将麻醉的果蝇倒于瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。 注意事项 麻醉剂的使用:乙醚有毒, 挥发性强,使用时,要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。 麻醉深度:麻醉果蝇时,要防止麻醉过度,影响继代培养。 做好标记:新转移的培养瓶上需贴好标签,注明继代培养日期及实验者姓名。 实验原理 遗传基本规律:分离规律;自由组合规律;伴性遗传规律;连锁与互换规律。 1、一对相对性状:长翅(雌)×残翅(雄);残翅(雌)×长翅(雄) 2、两对相对性状:灰残(雌)×檀黑长(雄);檀黑长(雌)×灰残(雄) 3、伴性遗传:红(雌)×白(雄);白(雌)×红(雄) 实验操作流程 1、根据设计分取突变体 2、果蝇饲养 3、收集处女蝇。雌蝇羽化后8~12h不交配。亲本和F1雌蝇都必需是处女蝇。 4、按组合收集雌雄蝇杂交,贴上标签(组合名称、杂交日期、小组名称) 5、 6~7d后,幼虫出现后,放去成蝇(记日期),种蝇要放干净。 6、3~4d后,连续观察记录F1性状,并统计数字(麻醉后倒在白瓷板上进行统计)。 F1性状若不符合设计要求,终止实验。 7、选出5-6对F1雌雄蝇做兄妹交。 8、 6~7d后放飞F1代亲本(记录日期)。 9、 3~4d后,F2代成蝇出现,连续观察统计各种性状,F3代出来后停止记录。 实验结果与分析 1、每组根据自己的设计将各代正反交的结果填入表格。 2、将记录结果整理,分别做X2测验,看其是否符合遗传规律。F1代要多于30只,F2代要多于50只。记录好放飞时间(亲代和F1代)。 3、对结果进行分析。 本实验的内容和要求还可以扩展到有关数量性状的遗传分析、果蝇诱变实验设计等,自行决定,但实验前要写好设计方案,涉及原理、实验流程、参考文献等。 诱变实验(设计性实验) 实验
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